[發明專利]一種定量RNaseH活性測定方法有效
| 申請號: | 201410502173.3 | 申請日: | 2014-09-28 |
| 公開(公告)號: | CN104293931B | 公開(公告)日: | 2017-01-18 |
| 發明(設計)人: | 徐曉昱;王靜 | 申請(專利權)人: | 南京諾唯贊生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68;C12Q1/44 |
| 代理公司: | 南京正聯知識產權代理有限公司32243 | 代理人: | 王素琴 |
| 地址: | 210014 江蘇省*** | 國省代碼: | 江蘇;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 定量 rnaseh 活性 測定 方法 | ||
1.?一種定量RNaseH活性測定方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:以一段RNA模板為底物,在DNA引物存在下,利用逆轉錄酶合成cDNA,形成DNA-RNA雜合鏈;以該DNA-RNA雜合鏈為底物,加入RNaseH酶,進行降解反應;降解反應后測定DNA單鏈或DNA-RNA雜合鏈的相對量,由該測定結果推導出RNaseH酶的活性程度。
2.?如權利要求1所述的定量RNaseH活性測定方法,其特征在于,DNA單鏈或DNA-RNA雜合鏈的相對量是利用熒光染料,通過熒光法測得的,并且該相對量是以熒光強度表示的。
3.?如權利要求2所述的定量RNaseH活性測定方法,其特征在于,所用的熒光染料是雙鏈特異性熒光染料。
4.?如權利要求3所述的定量RNaseH活性測定方法,其特征在于,所用的雙鏈特異性熒光染料是picogreen染料。
5.?如權利要求1所述的定量RNaseH活性測定方法,其特征在于,所用RNA模板為一段polyA?RNA單鏈,所用的DNA引物為Oligo?dT。
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