[發明專利]一種T4 DNA聚合酶活性測定方法無效
| 申請號： | 201410502171.4 | 申請日： | 2014-09-28 |
| 公開（公告）號： | CN104313132A | 公開（公告）日： | 2015-01-28 |
| 發明（設計）人： | 徐曉昱;劉來花;王靜 | 申請（專利權）人： | 南京諾唯贊生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/48 |
| 代理公司： | 南京正聯知識產權代理有限公司 32243 | 代理人： | 王素琴 |
| 地址： | 210014 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 t4 dna 聚合 活性 測定 方法 | ||
【權利要求書】：
1.?一種T4?DNA聚合酶活性測定方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：在無dNTP存在的情況下，在以雙鏈線性DNA模板為底物的反應體系中加入T4?DNA聚合酶，反應完成后檢測雙鏈DNA的相對量，由此測出T4?DNA聚合酶的外切酶活性，并使T4?DNA聚合酶的外切酶活性與聚合酶活性相關，得到T4?DNA聚合酶的聚合酶活性程度。
2.?如權利要求1所述的T4?DNA聚合酶活性測定方法，其特征在于，雙鏈DNA的相對量是利用熒光染料，通過熒光法測得的，并且雙鏈DNA的相對量是以熒光強度表示的。
3.?如權利要求2所述的T4?DNA聚合酶活性測定方法，其特征在于，所采用的熒光染料是雙鏈DNA特異性熒光染料。
4.?如權利要求3所述的T4?DNA聚合酶活性測定方法，其特征在于，所采用的染料是picogreen染料。
5.?如權利要求1所述的T4?DNA聚合酶活性測定方法，其特征在于，所采用的雙鏈線性DNA模板是以λDNA為底物，在正向和反向引物的存在下通過PCR擴增獲得的線性雙鏈DNA。
6.?如權利要求5所述的T4?DNA聚合酶活性測定方法，其特征在于，所用正向引物為5’-aataacgtcggcaactttgg-3’，反向引物為5’-gttacgccaccagtcatcct-3’。
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