[發(fā)明專利]一種定量核酸外切酶I活性測定方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410502152.1 | 申請日： | 2014-09-28 |
| 公開（公告）號： | CN104293928A | 公開（公告）日： | 2015-01-21 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 曹林;徐曉昱;王靜 | 申請（專利權(quán)）人： | 南京諾唯贊生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/44 |
| 代理公司： | 南京正聯(lián)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 32243 | 代理人： | 王素琴 |
| 地址： | 210014 江蘇省*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 定量 核酸外切酶 活性 測定 方法 | ||
1.?一種定量核酸外切酶I活性測定方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：首先提供與單鏈DNA模板互補(bǔ)的引物，隨后加入核酸外切酶I進(jìn)行外切反應(yīng)；外切反應(yīng)后，加入單鏈DNA模板并退火，形成單鏈DNA模板/引物復(fù)合物；其后加入聚合酶，合成雙鏈DNA；接著測定反應(yīng)體系中單鏈或雙鏈DNA的相對量，并由測定結(jié)果推導(dǎo)出核酸外切酶I活性程度，其中核酸外切酶I活性程度與反應(yīng)體系中雙鏈DNA的量成反比。
2.?如權(quán)利要求1所述的定量核酸外切酶I活性測定方法，其特征在于，雙鏈DNA或單鏈DNA的相對量是利用熒光染料，通過熒光法測得的，并且雙鏈DNA或單鏈DNA的相對量是以熒光強(qiáng)度表示的。
3.?如權(quán)利要求2所述的定量核酸外切酶I活性測定方法，其特征在于，所采用的熒光染料是雙鏈DNA特異性熒光染料。
4.?如權(quán)利要求3所述的定量核酸外切酶I活性測定方法，其特征在于，所采用的染料是picogreen染料。
5.?如權(quán)利要求1所述的定量核酸外切酶I活性測定方法，其特征在于，所采用的單鏈DNA模板是單鏈環(huán)狀DNA模板。
6.?如權(quán)利要求5所述的定量核酸外切酶I活性測定方法，其特征在于，所采用的單鏈DNA模板是M13噬菌體單鏈DNA。
7.?如權(quán)利要求1所述的定量核酸外切酶I活性測定方法，其特征在于，所采用的聚合酶為Taq酶。
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