[發(fā)明專利]一種三維結(jié)構(gòu)rGO-MWCNT-Pd無標(biāo)記豬細(xì)小病毒傳感器制備方法及應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410499241.5
• 申請(qǐng)日: 2014-09-26
• 公開（公告）號(hào): CN104297473A
• 公開（公告）日: 2015-01-21
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹偉;劉蕾;魏琴;閆濤;馬洪敏;朱寶存;李月云;吳丹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 濟(jì)南大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N33/569
• 分類號(hào): G01N33/569;G01N27/327;G01N27/48
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種三維結(jié)構(gòu)rGO-MWCNT-Pd無標(biāo)記豬細(xì)小病毒傳感器制備方法及應(yīng)用，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將直徑為4?mm的玻碳電極用Al₂O₃拋光粉打磨，超純水清洗干凈；滴加?6μL、0.5?~?2?mg/mL?的三維結(jié)構(gòu)的rGO-MWCNT-Pd納米復(fù)合物溶液于電極表面，?室溫下晾干；

（2）滴加6?μL、5~10?μg/mL?的豬細(xì)小病毒抗體于電極表面，4?℃冰箱中晾干，超純水沖洗，4?℃冰箱中晾干；

（3）滴加3?μL、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1~2%的BSA溶液于電極表面，封閉電極表面上非特異性活性位點(diǎn)，4?℃冰箱中晾干，超純水沖洗，4?℃冰箱中晾干；

（4）滴加6?μL、0.01~25?ng/mL的一系列不同濃度的豬細(xì)小病毒抗原標(biāo)準(zhǔn)溶液于電極表面，4?℃冰箱中晾干，超純水沖洗，4?℃冰箱中晾干，制得一種三維結(jié)構(gòu)rGO-MWCNT-Pd無標(biāo)記豬細(xì)小病毒傳感器。

2.如權(quán)利要求1?所述的一種三維結(jié)構(gòu)rGO-MWCNT-Pd無標(biāo)記豬細(xì)小病毒傳感器制備方法及應(yīng)用，所述三維結(jié)構(gòu)的rGO-MWCNT-Pd納米復(fù)合物溶液，制備步驟如下：?

（1）三維結(jié)構(gòu)的rGO-MWCNT納米復(fù)合物的制備

將20~40mg的多壁碳納米管MWCNT?加入到30?mL、?1~3?mg/mL?的氧化石墨烯均勻分散的溶液中，超聲30?min，將得到混合物置于50?mL?的高壓反應(yīng)釜中，加熱到160~190℃，保持12?h，冷卻到室溫，制得三維結(jié)構(gòu)的rGO-MWCNT納米復(fù)合物，冷凍干燥12?h；

（2）三維結(jié)構(gòu)的rGO-MWCNT-Pd?納米復(fù)合物溶液的制備

在劇烈攪拌的條件下，將?1mL?、7~13?mmol/L?的K₂PdCl_4?和5?mg?的三維結(jié)構(gòu)的rGO-MWCNT?納米復(fù)合物加入到10?mL的超純水中，冰浴30min，將得到混合物在7000?rpm下，離心分離5?min，用水洗滌，離心分離3次，35~50℃下真空干燥12h，制得三維結(jié)構(gòu)的rGO-MWCNT-Pd納米復(fù)合物，用超純水配制成0.5?~?2?mg/mL?的三維結(jié)構(gòu)的rGO-MWCNT-Pd納米復(fù)合物溶液。

3.如權(quán)利要求1?所述的制備方法制備的一種三維結(jié)構(gòu)rGO-MWCNT-Pd無標(biāo)記豬細(xì)小病毒傳感器，其特征在于，用于豬細(xì)小病毒的檢測(cè)，檢測(cè)步驟如下：

使用電化學(xué)工作站以三電極體系進(jìn)行測(cè)試，飽和甘汞電極為參比電極，鉑絲電極為輔助電極，所制備的無標(biāo)記豬細(xì)小病毒傳感器為工作電極，在15?mL、40~60?mmol/L、pH?6.0~8.0的鐵氰化鉀的PBS緩沖溶液中進(jìn)行測(cè)試；

用方波伏安方法對(duì)豬細(xì)小病毒抗原標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測(cè)，輸入電壓范圍為-0.2~0.6?V，靈敏度10^-4，掃描速度50?mV/s，繪制工作曲線；

將待測(cè)樣品溶液代替豬細(xì)小病毒抗原的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行檢測(cè)。