[發明專利]一種活性多糖的提取方法及其應用

在審

• 申請號: 201410495710.6
• 申請日: 2014-09-24
• 公開（公告）號: CN104250308A
• 公開（公告）日: 2014-12-31
• 發明（設計）人: 田連忠;劉雷;葛月蘭
• 申請（專利權）人: 江蘇紅豆杉藥業有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P35/00;A61P3/10;A61P37/04;A61P3/06;A61P9/12;A61P9/10
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 鞏克棟;楊晞

技術領域

本發明涉及一種活性多糖的提取方法，本發明還涉及一種活性多糖的應用，屬于藥用植物開發領域。

背景技術

多糖是由十個以上單糖由糖苷鍵連接而成的聚合物，廣泛存在于生物界中，其分子量從數萬到數百萬，有的高達上千萬。多糖是構成生命活動的四大物質之一，并與維持生命所需的多種生理功能密切相關。其最突出的功能主要有增強機體免疫能力、抗腫瘤作用、抗凝血作用，此外還具有抗病毒，降血糖、降血脂、促進核酸和蛋白質合成等生理功能。

紅豆杉是一種珍貴的藥用植物，是紅豆杉科紅豆杉屬植物的總稱。紅豆杉的藥用價值早在《本草綱目》中就有記載，主要用于治療霍亂、傷寒及用于排毒。現代中醫亦將其用于治療糖尿病、腎病及婦科疾病等。1993年，美國將其從紅豆杉中分離提取的紫杉醇類藥物投入市場，用于治療多種惡性腫瘤，紅豆杉便成為研究的熱門藥用植物之一。目前已從紅豆杉植物中分離出400多種化合物，主要成分為紫杉烷類和非紫杉烷類兩種。紫杉烷類為紫杉烷二萜類化合物，非紫杉烷類化合物主要為三萜、甾體、高萜、黃酮、苯丙素類和酚類等。隨著人們對紅豆杉的深入研究，紅豆杉其他成分的藥用功能逐步得到開發，研究報道紅豆杉多糖有抗腫瘤、免疫調節和預防控制心肌缺血再灌注損傷等功能。近年來，紅豆杉的人工種植面積不斷擴大，全面開發利用紅豆杉的生物活性成分，提高紅豆杉的綜合利用價值，對紅豆杉資源的合理利用和可持續發展具有重大意義。

多糖的提取方法很多，常用的主要有溶劑法、酸法、堿法、酶解法、超濾及二氧化碳超臨界萃取等方法，主要步驟就是破壞細胞壁、提取多糖，但是這些提取方法提取速度及提取率都有待提高。

發明內容

本發明所要解決的第一個技術問題是針對技術現狀提供一種提取率高、提取速度快的活性多糖的提取方法。

本發明所要解決的第二個技術問題是提供一種活性多糖的應用。

本發明解決上述第一個技術問題所采用的技術方案為：一種活性多糖的提取方法，包括如下步驟：

(1)準備紅豆杉原料；

(2)回流脫脂、抽慮，將紅豆杉原料用6號溶劑油回流脫脂，抽慮，對濾渣進行干燥處理，得到干燥的濾渣；

(3)酶解，將所述干燥的濾渣在浸泡劑中攪拌浸泡，然后加入占濾渣重量0.5％～1％的纖維素酶，得到混合液A，調節混合液A的pH至5.0～5.5，例如5.2、5.3、5.4，第一次酶解；然后加入占濾渣重量0.3％～1.0％(例如0.5％、0.7％、0.8％)的中性蛋白酶，得到混合液B，調節混合液B的pH至6.8～7.0，第二次酶解，滅酶，得到漿液；

(4)回流提取，對所述漿液進行回流提取處理，得到提取液，第一次離心分離，得到的上清液濃縮，獲得濃縮液，所述濃縮液醇沉，第二次離心分離，獲得沉淀物；

(5)由沉淀物獲得粗多糖。

其中，步驟(1)的操作過程為，紅豆杉枝和/或葉烘干、粉碎，過80～100目(例如85目、90目、95目、98目)篩，篩下物即為紅豆杉原料。其中，紅豆杉優選為人工栽培南方紅豆杉。

其中，步驟(2)中，所述回流脫脂的操作過程為，將紅豆杉原料置于回流提取罐中，加入紅豆杉原料重量3～5倍的6號溶劑油，回流脫脂5～7h(例如5.5h、6h、6.5h)。

其中，步驟(2)中，抽慮后回收6號溶劑油，所得的粗油脂精制得到紅豆杉精油；

優選的，步驟(2)中，對所述濾渣進行干燥處理的操作過程為，將所述濾渣置于干燥室內風干，得到干燥的濾渣。

其中，步驟(3)中，所述攪拌浸泡的操作過程為，將干燥后的濾渣置于加熱攪拌罐中，加入濾渣重量10～20倍(例如13倍、15倍、18倍)的浸泡劑，于45℃～55℃(例如48℃、50℃、52℃)下攪拌浸泡10～30min(例如15min、20min、25min)；

優選浸泡劑為水。

其中，步驟(3)中，所述第一次酶解的時間為1.5～2.5h，第一次酶解的溫度為50～60℃；所述第二次酶解的時間為50～70min，例如55min、60min、65min，第二次酶解后升溫至沸，滅酶5～20min，例如8min、10min、15min，得到漿液。

其中，步驟(4)中，所述回流提取處理的操作過程為，將所述漿液轉至回流提取罐中，于85～95℃下回流提取2～4h；

優選的，步驟(4)中，所述濃縮液的濃度為20％～40％，例如25％、30％、35％；

優選的，步驟(4)中，所述醇沉所用醇為95％的乙醇，其中95％是指純乙醇所占的體積份數，所述乙醇的重量為濃縮液重量的3～5倍；