[發(fā)明專利]一種低酸銀杏葉提取物的高效分離方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410483615.4
• 申請日: 2014-09-19
• 公開（公告）號: CN104208108A
• 公開（公告）日: 2014-12-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 鄒其芃
• 申請（專利權(quán)）人: 鄒其芃
• 主分類號: A61K36/16
• 分類號: A61K36/16
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務(wù)所(普通合伙) 32104
• 代理人: 殷紅梅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種低酸銀杏葉提取物的高效分離方法，具體地說是一種銀杏葉提取物的高效分離方法，涉及銀杏葉提取物的分離方法，屬于提取分離技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

銀杏是世界上最古老的樹種之一，被譽為“活化石”，銀杏為我國特產(chǎn)，資源擁有量占世界70％左右。銀杏葉是一種重要的藥用、保健食品原料，它的提取物(GBE,Egb,Extract?of?Ginkgo,biloba)具有相當(dāng)強的抗氧化作用，能清除生物體內(nèi)過剩的自由基，阻止體內(nèi)脂質(zhì)氧化，提高體體免疫力，延緩衰老等功能。近年來，國內(nèi)外特別是德國、日本、美國、法國等國家對銀杏葉的化學(xué)成份，分離方法進行了大量的研究，取得了較大進展。對溶劑萃取法及大孔吸附樹脂法進行了大量的研究，國內(nèi)現(xiàn)在以大孔吸附樹脂法為主。銀杏提取物采用德國Schwabe公司制定的GBE761標準：黃酮含量百分數(shù)≥24％，內(nèi)酯≥6％，銀杏酸酚≤5×10^-6。

銀杏葉提取物是各個制藥企業(yè)做為各種銀杏葉制劑的基礎(chǔ)原料。近年來，天然藥用植物提取物在國際市場上的銷售日漸提高，我國出口藥用植物提取物銀杏位列前三，國際需求量很大。然而，由于銀杏提取物的制備工藝水平各有異同，造成其質(zhì)量參差不齊，國內(nèi)種植銀杏的區(qū)域廣泛，采摘時間各異，其葉中的含量變化較大，致使同樣的工藝條件得到的提取物含量不穩(wěn)定，有時達不到國家藥典標準，難以滿足國內(nèi)及國際市場需求。因此，提供一種穩(wěn)定、可靠的銀杏葉提取物的制備工藝，在滿足市場的需求同時也能減少資源的浪費，具有廣闊的市場前景。另外，銀杏葉提取物中的有害成分卻限制了其制劑的進一步開發(fā)及臨床應(yīng)用，其中銀杏酚酸是引起臨床不良反應(yīng)的主要物質(zhì)，具致敏和致突變毒性。銀杏酚酸是銀杏葉提取物產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵指標之一，德國衛(wèi)生部門規(guī)定銀杏葉提取物制劑的銀杏酚酸的含量必須小于5μg·g^-1。

銀杏葉中含有黃酮類、萜類、酚類、生物堿類、聚異戊二烯、多糖等多種具有藥理作用的活性成分。銀杏提取物具有相當(dāng)強烈的抗氧化作用，能消除生物體內(nèi)過剩的自由基，阻止體內(nèi)脂質(zhì)過氧化，提高機體免疫能力促進血液循環(huán)及腦代謝，同時具有抗衰老、防止神經(jīng)系統(tǒng)疾病等功能。銀杏葉提取方法各異，但分離均采用大孔吸附樹脂法。其中授權(quán)公告號CN?100362011C銀杏葉提取物的制備方法大孔吸附樹脂用梯度洗脫法，洗脫劑第一次洗脫濃度為0％-30％洗脫劑，第二次洗脫濃度為40％-95％。

此專利方法分離銀杏提取物需重復(fù)上柱，工業(yè)化生產(chǎn)比較復(fù)雜，不利于大規(guī)模生產(chǎn)。該提純主要采用固定床分離法，并且需要重復(fù)過二次大孔吸附柱。該傳統(tǒng)分離方法分離得到的黃酮及內(nèi)酯存在純度低、洗脫劑消耗大、周期長、環(huán)保壓力大、樹脂利用率不高等諸多缺點。因此需要開發(fā)高效的分離提純工藝，以提高產(chǎn)品質(zhì)量，提倡綠色化學(xué)。

銀杏葉提取物純化時去除銀杏酚酸的方法有兩種，一種是用一般的大孔吸附附樹脂純化銀杏黃酮及銀杏內(nèi)酯，再通過DAD-1大孔吸附樹脂去除銀杏酚酸。另一種為用非極性的有機溶劑萃取去除銀杏酚酸。本技術(shù)采取混合樹脂一步完成銀杏黃酮與內(nèi)酯的純化與脫酸，達到了很好的效果。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于克服上述不足之處，提供一種低酸銀杏葉提取物的高效分離方法，利用連續(xù)色譜對銀杏葉化合物進行分離，黃酮及內(nèi)酯含量均較高。

按照本發(fā)明提供的技術(shù)方案，一種低酸銀杏葉提取物的高效分離方法，步驟如下：

(1)銀杏提取液的制備：取銀杏葉，粉碎成過15～25目的粗粉；濕潤后進行滲漉，或經(jīng)過回流提取得到銀杏提取液；

濕潤后進行滲漉的過程為：按粗粉：乙醇重量比為1：1加入質(zhì)量濃度為50％～95％的乙醇進行濕潤，濕潤3～8小時后，再繼續(xù)添加乙醇進行滲漉，滲漉20～48小時，乙醇的流速為1～3mL/分鐘/kg；

或回流提取的過程為：加入粗粉5～8倍量乙醇，65～85℃回流提取2～3小時，過濾；然后加入粗粉3～7倍量乙醇在相同條件重復(fù)進行回流提取，得到銀杏提取液，過濾后得到銀杏提取液；乙醇的質(zhì)量濃度為50％～95％；

(2)濃縮過濾：將步驟(1)得到的銀杏提取液在60～85℃真空濃縮2～8小時，真空度為-0.08MPa，濃縮至每2.5kg粗粉得到濃縮液小于等于1L，然后采用純化水定容至1L，冷卻至-1℃～20℃時沉降8～24小時，然后通過石英沙過濾；

(3)吸附分離：采用連續(xù)色譜分離系統(tǒng)對步驟(2)所得濃縮過濾后的銀杏提取液進行分離，采用的色譜柱為20～30根；連續(xù)色譜分離系統(tǒng)分為吸附區(qū)、洗雜區(qū)、解析區(qū)和再生清洗區(qū)四個區(qū)；