[發明專利]一種滅螺細菌及其制備生物滅螺劑的方法有效
| 申請號： | 201410477758.4 | 申請日： | 2014-09-17 |
| 公開（公告）號： | CN104531547B | 公開（公告）日： | 2019-06-18 |
| 發明（設計）人： | 張倩;孫啟祥;袁藝;丁洲 | 申請（專利權）人： | 中國林業科學研究院林業研究所 |
| 主分類號： | C12N1/20 | 分類號： | C12N1/20;A01N63/00;A01P9/00;C12R1/01 |
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| 地址： | 101101*** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 細菌 及其 制備 生物 滅螺劑 方法 | ||
1.一種滅螺細菌，分類命名為陰溝腸桿菌B2(Enterobacter cloacae B2)，所述滅螺細菌的生物保藏號為CCTCC M 2014103，保藏單位為中國典型培養物保藏中心，保藏地址為中國武漢大學，保藏日期為2014年3月26日。
2.根據權利要求1所述一種滅螺細菌獲取PCR擴增產物的方法，其特征在于：將純化后的滅螺細菌CCTCC M 2014103接種到YEB固體培養基上，37℃培養12～16小時，挑取單菌落進行菌落PCR，所述菌落PCR的引物為細菌16SrRNA通用引物27F和R518，所述引物的序列為：
SEQ NO.2：27F：AGAGTTTGATCCTGGCTCAG
SEQ NO.3：R518：ATTACCGCGGCTGCTGG；
所述菌落PCR的擴增程序為：94℃預變性3分鐘，94℃變性30秒，55℃退火30秒，72℃延伸1分鐘，循環30次，72℃繼續延伸7分鐘，獲得PCR擴增產物。
3.一種滅螺細菌制備生物滅螺劑及其稀釋液的方法，其特征在于：
1)滅螺劑的制備
將保藏號為CCTCC M 2014103的滅螺細菌接種于100mL的YEB液體培養基中，37℃下培養24小時，培養的轉速為180rpm，得到種子液，將1mL種子液轉移到100mL的YEB液體培養基中，37℃培養12～16小時，培養的轉速為180rpm，獲得發酵液，即為生物滅螺劑；
2)滅螺劑稀釋液的配制
將滅螺劑用去氯水配制成體積分數為10％的溶液，即為滅螺劑稀釋液。
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