[發明專利]一種真菌發酵液及其應用

有效

• 申請號: 201410477645.4
• 申請日: 2014-09-18
• 公開（公告）號: CN104313103B
• 公開（公告）日: 2017-02-01
• 發明（設計）人: 牛雪梅;張克勤;李東嫻;王彥利
• 申請（專利權）人: 云南大學
• 主分類號: C12P33/00
• 分類號: C12P33/00;C12R1/80
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司53115
• 代理人: 楊宏珍

1.一種真菌YMF?1.00864發酵液，其特征在于該真菌YMF?1.00864發酵液經如下步驟得到：

(1)真菌的培養

將先在YGP固體培養基中活化3天的保藏號為CGMCC?No.7407的青霉(Penicillium?sp.)YMF?1.00864菌種保存在PDA固體培養基斜面上，使用時，在無菌條件下切取±2cm?x±2cm的菌塊，分別接種于滅菌的YGP、CML、YGS、BEP、YBS液體培養基250mL中，在28℃發酵3天，然后用液體接種法接種YGP液體培養基中，每瓶接種量為25mL，培養條件為500mL三角瓶裝量250mL，每株菌發酵5L,28℃，180rpm培養12天；其中：

PDA固體培養基為：去皮馬鈴薯200g，切成小塊后煮沸30min，4層紗布過濾，在濾液中加入20g葡萄糖，加水定容至1L，加入1.5％(m/v)的瓊脂，121℃滅菌20分鐘后待用；

YGP固體培養基為：酵母膏5g，葡糖糖10g，蛋白胨1g，放入水中加熱至完全溶解，加水定容至1L，加入1.5％(m/v)的瓊脂則為固體培養基，121℃滅菌20分鐘后待用；

CML液體培養基為：稱取20g玉米粉，加適量水煮沸30min，4層紗布過濾，定容至1L，21℃滅菌20min；

YGS液體培養基為：稱取5g酵母膏、1g大豆蛋白，10g葡萄糖，放入水中加熱至完全溶解，加水定容至1L，121℃滅菌20min；

BEP液體培養基為：稱取2g牛肉膏、1g蛋白胨、10g葡萄糖，放入水中加熱至完全溶解，加水定容至1L，121℃滅菌20min；

YBS液體培養基為：稱取2g酵母膏、1g大豆蛋白胨、1g牛肉膏，10g葡萄糖，放入水中加熱至完全溶解，加水定容至1L，121℃滅菌20min；

YGP液體培養基為：酵母膏5g，葡糖糖10g，蛋白胨1g，放入水中加熱至完全溶解，加水定容至1L，121℃滅菌20分鐘后待用；

(2)發酵液的收集和萃取

將上述真菌YMF?1.00864發酵液過濾得到菌液部和菌絲體部，菌液部分常規減壓濃縮后用乙酸乙酯以體積比1:1萃取三次，合并乙酸乙酯部，減壓濃縮蒸干，得到真菌YMF?1.00864發酵液乙酸乙酯部粗提物。

2.權利要求1所述的真菌YMF?1.00864發酵液在制備分離膽酸及鵝去氧膽酸中的應用。