[發明專利]人源化的FcγR小鼠

在審

• 申請號: 201410471291.2
• 申請日: 2010-12-17
• 公開（公告）號: CN104232589A
• 公開（公告）日: 2014-12-24
• 發明（設計）人: L·麥克唐納;涂納新;C·古爾;S·史蒂文斯;A·J·墨菲
• 申請（專利權）人: 瑞澤恩制藥公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;A01K67/027
• 代理公司: 北京商專永信知識產權代理事務所(普通合伙) 11400
• 代理人: 鄔玥;葛強

1.一種制備包含遺傳修飾的小鼠的方法，包括工程化小鼠以包含內源FcγRIIBα鏈基因中的純合破壞、內源FcγRIVα鏈基因中的純合破壞、內源FcγRIIIα鏈基因中的純合破壞。

2.如權利要求1所述的方法，其中小鼠包括與野生型小鼠對于相同抗原的能力相比較減小的對抗原產生免疫應答的能力。

3.如權利要求1所述的方法，其中小鼠包括至少50％減小的抗體依賴性細胞介導的細胞毒性(ADCC)。

4.如權利要求1所述的方法，其中小鼠包含功能性的FcRγ鏈。

5.如權利要求1至4中任一項所述的方法，其中小鼠表達人CD20。

6.一種遺傳修飾的小鼠細胞，其基因組包含內源FcγRIIBα鏈基因中的純合破壞，內源FcγRIVα鏈基因中的純合破壞，內源FcγRIIIα鏈基因中的純合破壞。

7.如權利要求6所述的細胞，其中細胞包含功能性的FcRγ鏈。

8.如權利要求6所述的細胞，其中細胞是胚胎干(ES)細胞。

9.如權利要求6所述的細胞，其中細胞是天然殺傷(NK)細胞。

10.如權利要求6至9中任一項所述的細胞，其中細胞包含人CD20基因。

11.一種鼠細胞，其基因組包含以至少兩個低親和力人FcγRα鏈基因替代內源低親和力FcγRα鏈基因，其中細胞包含功能性內源FcRγ鏈并且功能性地表達至少兩個低親和力人FcγRα鏈基因。

12.如權利11所述的鼠細胞，其中細胞是淋巴細胞。

13.如權利要求12所述的鼠淋巴細胞，其中淋巴細胞是B細胞。

14.如權利要求12所述的鼠淋巴細胞，其中淋巴細胞是天然殺傷細胞。

15.如權利要求11所述的鼠細胞，其中細胞是鼠胚胎干細胞。

16.如權利要求11至15中任一項所述的鼠細胞，其中至少兩個低親和力人FcγRα鏈基因選自下組：人FcγRIIAα鏈基因、人FcγRIIBα鏈基因、人FcγRIICα鏈基因、人FcγRIIIAα鏈基因和人FcγRIIIBα鏈基因。

17.如權利要求11至15中任一項所述的鼠細胞，其中至少兩個低親和力人FcγR基因是人FcγRIIAα鏈基因和人FcγRIIIAα鏈基因。

18.如權利要求17所述的鼠細胞，其中人FcγRIIIAα鏈基因包括在氨基酸位點158上的苯丙氨酸。

19.如權利要求17所述的鼠細胞，其中人FcγRIIIAα鏈基因包括在氨基酸位點158上的纈氨酸。

20.如權利要求11至15中任一項所述的鼠細胞，其中，鼠細胞的基因組包含人FcγRIIBα鏈基因、人FcγRIICα鏈基因和人FcγRIIIBα鏈基因。

21.如權利要求13所述的B細胞，進一步包含編碼人CD20蛋白的人核苷酸序列。

22.一種鼠胚胎，包括權利要求15所述的胚胎干細胞。

23.一種鼠天然殺傷細胞，其基因組包括替代內源FcγRIIB、FcγRIII和FcγRIVα鏈基因的人FcγRIIIAα鏈基因，其中細胞功能性地表達人FcγRIIIAα鏈基因和在其表面上的鼠FcRγ鏈。

24.一種制備遺傳修飾的鼠科動物的方法，其基因組包含以至少兩個低親和力人FcγRα鏈基因替代內源低親和力FcγRα鏈基因，包括使用權利要求15所述的鼠胚胎干細胞。

25.一種制備遺傳修飾的鼠胚胎干細胞的方法，其基因組包含以至少兩個低親和力人FcγRα鏈基因替代內源低親和力FcγRα鏈基因，該方法包括以至少兩個低親和力人FcγRα鏈基因替代鼠胚胎干細胞基因組中的內源低親和力FcγRα鏈基因。

26.如權利要求22所述的方法，其中內源低親和力FcγRα鏈基因被人FcγRIIAα鏈基因和人FcγRIIIAα鏈基因替代。