[發明專利]基于納米材料復合物的溶膠凝膠分子印跡電化學傳感器檢測丙烯酰胺的方法

有效

• 申請號: 201410471090.2
• 申請日: 2014-09-16
• 公開（公告）號: CN104181216A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 劉霞;毛祿剛;楊陽
• 申請（專利權）人: 湖南農業大學
• 主分類號: G01N27/30
• 分類號: G01N27/30;G01N27/26
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 何為;袁穎華

技術領域

本發明涉及食品有害成分的檢測和電化學傳感器領域，具體的是涉及一種檢測丙烯酰胺的溶膠凝膠分子印跡的電化學傳感器方法。?

背景技術

丙烯酰胺(acrylamide,AM)是一種白色晶體物質，室溫下穩定，易溶于水、甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等有機溶劑。AM對人體有明顯毒性，可造成人體神經系統的損害。動物實驗和體外細胞實驗都證明AM可導致遺傳物質改變和癌癥的發生。AM被國際癌癥研究機構(IARC)列為2A類致癌物(ⅡA)。?

2002年4月，食品中首次發現AM，以薯條為代表的富含碳水化合物的高溫加工食品中尤為豐富。研究表明，食品中的AM主要是由于馬鈴薯和谷類食品原料中的天冬酰胺通過美拉德反應在經過高溫烹調后生成。2005年，WHO與FAO食品添加劑聯合專家委員會(JECFA)第64次會議對AM進行了系統的危險性評估，并警告公眾關注食品中的AM，呼吁采取措施減少食品中AM含量，以確保食品安全。我國將食品中丙烯酰胺的檢測列為“十五”國家重大科技專項“食品安全關鍵技術”課題，衛生部食品安全計劃也將食品中丙烯酰胺的檢測方法的建立和我國食品中AM分布調查作為一個重要內容。?

目前，食品中丙烯酰胺含量的檢測主要是應用現代色譜技術(GC,LC)等與質譜法(MS)串聯，如液-質聯用法(LC-MS)、氣-質聯用法(GC-MS)、液相色譜-串聯質譜分析法(LC-MS/MS)等方法。該些方法在分析時間、成本及普及性方面各有長短，但是樣品前處理比較復雜，操作繁瑣，檢測時間長，成本高，且這些分析方法儀器設備貴重，需專業人員進行操作。?

發明內容

本發明的目的是，針對目前現有食品中丙烯酰胺的檢測方法中存在的樣品?前處理復雜，操作繁瑣，檢測時間長、成本高的問題，提供一種基于納米材料復合物的溶膠凝膠分子印跡電化學傳感器檢測丙烯酰胺的方法，該方法具有良好的靈敏度，特異性，重現性和回收率，可用于實際食品樣品中丙烯酰胺的檢測。?

為了達到上述目的，本發明采用的技術方案是：一種基于納米材料復合物的溶膠凝膠分子印跡電化學傳感器檢測丙烯酰胺的方法，該方法是將修飾有碳納米管、金納米粒子和殼聚糖的復合物的玻碳電極，置于含有丙烯酰胺的溶膠凝膠溶液中進行電化學沉積，制得分子印跡電化學傳感器，用該傳感器對樣品中的丙烯酰胺直接進行檢測。?

上述溶膠凝膠分子印跡傳感器直接檢測丙烯酰胺的具體過程如下，結合參見圖1：?

1、金鈉米粒子溶液的制備：按1ml?1％HAuCl₄溶液加99ml超純水的比例，將HAuCl₄溶液和超純水混合，在150-250r/min，220℃下，于磁力攪拌器加熱至沸騰后，再按100ml0.01％HAuCl₄溶液加2.4ml1％檸檬酸三鈉溶液的比例，迅速加入1％檸檬酸三鈉溶液，繼續攪拌加熱8-12min，待溶液由灰色到透亮的紅色后停止加熱，再攪拌8-12min，冷卻至室溫,就制得所需的金納米粒子溶液。將得到的金納米粒子溶液置于4℃冰箱中備用。?

2、碳納米管(MWNT)的活化：將碳納米管置于混酸(濃硫酸和濃硝酸按體積比3:1混合)中超聲處理3-4h(每25mg碳納米管需加4ml混酸)，將得到的碳納米管溶液用超純水離心(9000-11000r/min，4-6min)沖洗至中性，即可得到羧基化的碳納米管(MWNT-COOH)。?

3、碳納米管、金納米粒子和殼聚糖復合物的制備：在室溫下，將活化后的MWNT先在體積比為1:1的50mg/mLEDC和50mg/mL?NHS的混合液中孵化0.5-1.5h(每1mg活化后的碳納米管加1ml混合液)，再于半胱胺中孵化0.5-1.5h(每1mg活化后的碳納米管加1ml半胱胺)，使其表面帶有巰基，再用超純水沖洗，?在室溫下干燥后與上述金納米粒子溶液混合0.5-1.5h(1mg帶巰基的碳納米管加1ml金納米粒子溶液)，得到碳納米管與金納米粒子的復合物。然后按體積比1:2的比例將碳納米管與金納米粒子的復合物與2.0wt％殼聚糖溶液混合均勻。?