[發(fā)明專利]可可粉中活性成分的指紋圖譜測定方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410470234.2
• 申請(qǐng)日: 2014-09-15
• 公開（公告）號(hào): CN104215711A
• 公開（公告）日: 2014-12-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 朱穎;鄭翊;李丹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖北中煙工業(yè)有限責(zé)任公司;武漢市黃鶴樓科技園有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 武漢開元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42104
• 代理人: 馬輝;孫林

1.一種可可粉中活性成分的指紋圖譜測定方法，其特征在于，它包括以下步驟：

(a)對(duì)照品溶液的制備：精密稱取表兒茶素對(duì)照品，加入甲醇與水體積比為1:1的溶液溶解，制成每1mL含表兒茶素66μg的溶液，即得；

(b)供試品溶液的制備：精密稱取可可粉0.25～2.5g，加入甲醇與水體積比為1:1的溶液50～500mL，超聲提取30～60min，過濾，取續(xù)濾液，即得；

(c)設(shè)定色譜條件：用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填料，流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為質(zhì)量百分?jǐn)?shù)為0.05％磷酸緩沖鹽溶液；采用梯度洗脫方式，其洗脫程序?yàn)椋?/p>

0min→20min，流動(dòng)相A為10％→15％、流動(dòng)相B為90％→85％，

20min→30min，流動(dòng)相A為15％→30％、流動(dòng)相B為85％→70％；

檢測波長210nm，流速為0.8mL/min，柱溫30℃；理論塔板數(shù)按表兒茶素峰計(jì)，不低于6000；

(d)標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的獲得：精密吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液10μL，按照設(shè)定的色譜條件，注入高效液相色譜儀，通過對(duì)照品表兒茶素的色譜峰，確定供試品溶液色譜圖中的表兒茶素峰，按照色譜圖方法學(xué)考察的方法得到可可粉的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜；

(e)色譜分析：將每批次所得的供試品溶液的指紋圖譜與可可粉標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜經(jīng)中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)比較，來確定可可粉的質(zhì)量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述可可粉中活性成分的指紋圖譜測定方法，其特征在于：所得到的可可粉的標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜檢測出5個(gè)特征指紋峰，5號(hào)峰為表兒茶素，

1號(hào)峰：保留時(shí)間：4.82±0.2min，

2號(hào)峰：保留時(shí)間：6.87±0.2min，

3號(hào)峰：保留時(shí)間：14.64±0.2min，

4號(hào)峰；保留時(shí)間：17.52±0.2min，

5號(hào)峰：保留時(shí)間：21.13±0.2min。