[發明專利]一種具有免疫活性的新型紅托竹蓀多糖及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201410470022.4
• 申請日: 2014-09-15
• 公開（公告）號: CN104262500B
• 公開（公告）日: 2017-04-05
• 發明（設計）人: 楊繼國;林澤華;廖文鎮;任嬌艷;張榕;寧正祥
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P37/02;A61P35/00;A23L33/125
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司44102
• 代理人: 何淑珍

技術領域

本發明涉及一種免疫活性多糖及其制備方法和應用，具體涉及一種具有免疫活性的新型紅托竹蓀多糖及其制備方法和應用。

背景技術

竹蓀（Dictyophora?indusiata），別名“竹笙”，是對一大類竹蓀屬真菌的總稱，隸屬于真菌門（Eumycota）、擔子菌亞門（Basidiomycotina)、腹菌綱（Gasteromycetes）、鬼筆目（Phallales）、鬼筆科（Phallaceae）。

竹蓀是寄生在枯竹根部的一種隱花菌類，形狀略似網狀干白蛇皮，它有深綠色的菌帽，雪白色的圓柱狀的菌柄，粉紅色的蛋形菌托，在菌柄頂端有一圍

細致潔白的網狀裙從菌蓋向下鋪開，被人們稱為“雪裙仙子”、“山珍之花”、“真菌之花”、“菌中皇后”。竹蓀可分為菌絲體與子實體兩部分，竹蓀的營養體是菌絲體，竹蓀的子實體分菌托、菌柄、菌裙和菌蓋四部分，人們常說的竹蓀就是指它的子實體。紅托竹蓀是中國特產的竹蓀種類，是一種珍貴的藥食兩用真菌。野生的紅托竹蓀主要分布于中國云南、四川、浙江、貴州中西部等省區竹林下的腐土上。目前已經進行大規模的人工栽培。

竹蓀營養豐富，香味濃郁，滋味鮮美，自古就列為“草八珍”之一。據史料記載，早在公元618年，中國就開始栽培和食用竹蓀，并且把它作為一種藥用真菌來治療炎癥、胃病和神經性疾病等。竹蓀具有很好的營養價值，比如有益于眼睛和心血管系統；還具有藥理作用如養心安神、抗腫瘤、抗氧化、抗炎癥、抗凝血等。竹蓀菌體含有豐富的蛋白質及氨基酸成分，比如棘托竹蓀菌體含有21?種氨基酸，8?種為人體所必需氨基酸。竹蓀還含有豐富的維生素E、β-胡蘿卜素、硫胺素、核黃素、煙酸、維生素C、鈣和磷酸鹽等。

竹蓀具有降血壓、血糖，抗腫瘤，增強免疫功能及抑菌等藥用價值，對竹蓀藥用研究主要集中在竹蓀多糖、竹蓀凝集素、竹蓀抑菌以及一些小分子活性成分方面。竹蓀多糖廣泛存在于子實體的細胞壁中，是具有高活性的大分子物質，在抗腫瘤、抗凝血、抗炎癥、刺激免疫以及降血糖方面都有一定的療效。

華洋林報道了竹蓀子實體經水溶液提取后，濾渣采用堿提，1M?HCl溶液提取，濾液真空濃縮后得到竹蓀粗多糖?Di-1；濾渣再用1%?NaOH溶液提取，濾液真空濃縮后得到竹蓀粗多糖?Di-2。免疫動物實驗表明：Di-1?和?Di-2?均有不同程度的增強免疫的作用。（華洋林，華南理工大學博士學位論文，2011）。王蓓蓓報道了紅托竹蓀粗多糖對超氧陰離子自由基、羥基自由基、DPPH自由基具有一定的清除作用，對細菌（金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸桿菌）、真菌（啤酒酵母、蘋果青霉）均有抑菌作用（王蓓蓓，陜西師范大學碩士學位論文，2012）。田甜報道了棘托竹蓀菌蓋多糖具有一定的體外抗氧化活性，并且對酵母菌、青霉菌、白色葡萄球菌、蠟狀芽孢桿菌和大腸桿菌均有一定的抑制作用（田甜，陜西師范大學碩士學位論文，2012）。徐靜靜報道了竹蓀子實體水不溶性多糖的硫酸酯和磷酸酯衍生物對B16和MCF-7兩種腫瘤細胞的生長有較強的抑制作用，其中對B16的抑制率分別為40.07%和28.96%，對MCF-7?的抑制率低于?25%（徐靜靜，江南大學碩士學位論文，2012）。王家堂報道了竹蓀80?℃熱水提的水溶性多糖PD3的分離純化方法、化學組成、分子結構以及三螺旋構象特征（王家堂，武漢理工大學碩士學位論文，2009）。

專利申請公開號為CN1165148的專利公開了“一種竹蓀多糖的制備方法”，公開日期為1997-11-19，申請人為中國科學院大連化學物理研究所。該方法利用竹蓀的菌蓋、菌托和竹蓀加工的下角料或深層發酵技術生產的竹蓀營養菌絲體為原料，經預處理、熱水抽提、醇析、透析和洗滌等主要工序制成粗多糖，其中熱水抽提工序是在80~100?℃下用水進行浸泡原料1~10小時，抽提過程可反復進行2~5次，為得到高純度產品可將粗多糖制成溶液用DEAE-纖維素柱進行層析分離，收集含多糖部分即可得到高純竹蓀多糖。

專利申請公開號為CN101029087的專利公開了“紅托竹蓀菌托中具有抑制腫瘤細胞生長的多糖的分離方法”，公開日期為2007-09-05，申請人為浙江大學。

該方法將紅托竹蓀菌托干燥、粉碎后，水提醇沉，分離析出物并烘干；將烘干的析出物配成水溶液，用Savege法脫蛋白后進行醇析，分離析出物并烘干后配成12?mg/mL的水溶液，在層析柱中進行分離，得到紅托竹蓀菌托多糖DRVP1。該紅托竹蓀菌托多糖DRVP1對腫瘤細胞的生長有明顯的抑制作用。