[發(fā)明專利]一種分步提取與生物轉(zhuǎn)化偶聯(lián)制備海帶降血壓制品的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410467572.0
• 申請(qǐng)日: 2014-09-15
• 公開（公告）號(hào): CN104256252B
• 公開（公告）日: 2017-01-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳繼承;王潔;李艷杰;陳麗嬌;陳藝暉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 福建農(nóng)林大學(xué)
• 主分類號(hào): A23L29/30
• 分類號(hào): A23L29/30;A23L33/18;A23L33/21;C07C29/76;C07C31/26;C12P21/06;C07K1/34;C08B37/04;A61K38/00;A61P9/12;A61K31/047;A61K31/734
• 代理公司: 福州元?jiǎng)?chuàng)專利商標(biāo)代理有限公司35100
• 代理人: 蔡學(xué)俊

1.一種分步提取與生物轉(zhuǎn)化偶聯(lián)制備海帶降血壓制品的方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）原料預(yù)處理：新鮮海帶或海帶下腳料清洗除雜后，60℃低溫烘干至恒重，粉碎成80~200目粉末，備用；

2）醇提甘露糖醇：將步驟1）中粉末與95wt.%乙醇以固液比為1:25~1:30進(jìn)行循環(huán)超聲輔助提取，時(shí)間50~60min，溫度50~55℃，減壓抽濾，濾渣真空干燥后備用；濾液濃縮后趁熱抽濾，0?℃下析晶，過濾干燥得海帶甘露糖醇產(chǎn)品；

3）酸提褐藻膠及褐藻糖膠：將步驟2）中濾渣與0.1mol·L^-1鹽酸溶液以固液比為1:35~1:50進(jìn)行循環(huán)超聲輔助提取，時(shí)間40~50min，溫度為50~60℃，離心備用；

4）醇沉褐藻膠及褐藻糖膠：將步驟3）中上清液用30~40wt.%乙醇沉淀，離心收集沉淀，無水乙醇洗滌即得褐藻膠，提取完褐藻膠的上清液用60~70wt.%的乙醇沉淀，離心收集沉淀、無水乙醇漂洗即得褐藻糖膠；收集上清液，與步驟3）中濾渣混合濃縮，冷凍干燥備用；?

5）梯度生物轉(zhuǎn)化：以血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制活性為指標(biāo)，在步驟3）0.1mol·L^-1鹽酸輕度水解的基礎(chǔ)上，將步驟4）中冷凍干燥物按固液比1:20~1:40，酶添加量為2~8wt.%依次加入不同的蛋白酶，按蛋白酶的最佳反應(yīng)條件可控酶解4~6?h，90?℃滅酶15~20?min，離心收集上清液；沉淀經(jīng)真空干燥即為海帶膳食纖維粗品；

6）超濾：步驟5）中上清液進(jìn)行超濾處理，截留10000?Da分子量以下組分，冷凍干燥得海帶降血壓肽；

7）科學(xué)配伍：將上述步驟中所得的5個(gè)海帶降血壓功能組分進(jìn)行科學(xué)配伍，獲得系列海帶降血壓制品。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述分步提取和生物轉(zhuǎn)化偶聯(lián)制備海帶降血壓制品的方法，其特征在于：所述梯度生物轉(zhuǎn)化中不同蛋白酶依次可控酶解順序?yàn)轱L(fēng)味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和堿性蛋白酶。

3.?一種如權(quán)利要求1所述方法制得的產(chǎn)品，其特征在于：所述工藝步驟可獲得具有降血壓功能的甘露糖醇、褐藻膠、褐藻糖膠、海帶膳食纖維和海帶降血壓肽五個(gè)產(chǎn)品。

4.?一種如權(quán)利要求1所述方法制得的海帶降血壓制品，其特征在于：所述海帶降血壓制品中的五種產(chǎn)品按重量比例計(jì)為：甘露糖醇15~23%，褐藻膠18~21%，褐藻糖膠11~19%，降血壓肽31~43%，膳食纖維16~25%。

5.?根據(jù)權(quán)利要求4所述方法制得的海帶降血壓制品，其特征在于：所述制品經(jīng)體外降血壓模型檢測(cè)，具有顯著的ACE抑制活性，其IC₅₀值為0.68?~?1.15?mg/g。