[發(fā)明專利]一種分步提取與生物轉化偶聯(lián)制備海帶降血壓制品的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410467572.0
• 申請日: 2014-09-15
• 公開（公告）號: CN104256252B
• 公開（公告）日: 2017-01-11
• 發(fā)明（設計）人: 陳繼承;王潔;李艷杰;陳麗嬌;陳藝暉
• 申請（專利權）人: 福建農林大學
• 主分類號: A23L29/30
• 分類號: A23L29/30;A23L33/18;A23L33/21;C07C29/76;C07C31/26;C12P21/06;C07K1/34;C08B37/04;A61K38/00;A61P9/12;A61K31/047;A61K31/734
• 代理公司: 福州元創(chuàng)專利商標代理有限公司35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

本發(fā)明屬于海洋食品精深加工領域，具體涉及一種分步提取和生物轉化偶聯(lián)制備輔助降血壓保健海帶制品的方法。

背景技術

高血壓是引起心腦血管疾病的重要危險因子，已成為嚴重的國際公共衛(wèi)生問題，然而，目前市場上所銷售的降血壓藥物大多為化學合成藥物，長時間服用易產生相應的副作用，引起身體不適。因此研發(fā)一種安全性高、副作用小、易吸收的食源性降血壓制品將十分重要。

海帶營養(yǎng)豐富、功能眾多，有“堿性植物之冠”之稱，具有很高的經濟價值，不但可以食用，補充人體內所需營養(yǎng)，而且在醫(yī)療保健方面有更多功用，如降血壓、降血脂及抗癌等，是醫(yī)藥工業(yè)寶貴的原材料。據(jù)資料記載，古往今來，食用海帶降低血壓是我國民間普遍使用的有效方法，日本也有通過飲用海帶浸泡液來降低血壓的民間習俗。由此可見，海帶為降血壓制品的研發(fā)提供了高品質的資源。

我國海帶總產量躍居世界首位，而利用率卻僅為30%，行業(yè)總體加工水平偏低，僅限于初級加工產品形式（如海帶絲、海帶結等）以及單一物質的提取（如甘露糖醇、褐藻酸鈉等），加工副產物中的褐藻糖膠、活性多肽、膳食纖維等優(yōu)質資源則被當成廢料廢棄，造成了海帶資源的極大浪費。例如，申請?zhí)枮?01310101070.1的發(fā)明專利“一種海帶營養(yǎng)成分的制備方法”（申請時間為2013.03.26），是以海帶為原料，采用微波提取法分步提取海帶中的甘露糖醇、低級性營養(yǎng)成分及多糖蛋白混合物等幾種營養(yǎng)成分。該專利大體上實現(xiàn)了海帶的綜合利用，得到了海帶的營養(yǎng)成分混合粗提物，但尚未得到具體的單一成分，也未能將營養(yǎng)成分的具體功效加以研究利用，經濟價值不高，不足以實現(xiàn)海帶的高值化利用，且步驟操作復雜，耗能巨大。

因此，開發(fā)一種分步提取和生物轉化偶聯(lián)制備海帶降血壓制品的方法，不僅能獲取甘露糖醇、褐藻膠、褐藻糖膠等單一組分的營養(yǎng)物質，且可以生物轉化得到短鏈活性小肽，科學配伍得到具有降血壓功效的海帶制品，實現(xiàn)了海帶高值化利用，且降低能耗、減少污染、節(jié)約成本，同時實現(xiàn)海帶資源回收利用，大大提升海帶產品附加值，進而帶動和促進海帶產業(yè)的發(fā)展。

發(fā)明內容

本發(fā)明目的在于提供一種以海帶為原料，分步提取與生物轉化偶聯(lián)制備降血壓制品的方法，以解決上述技術中存在的難題并實現(xiàn)海帶高值化綜合利用，進而大幅度提高海帶的附加值，降低海帶的資源浪費，同時降低生產成本，實現(xiàn)節(jié)能降耗。

?上述一種分步提取與生物轉化偶聯(lián)制備海帶降血壓制品的方法包括以下步驟：

1）原料預處理：新鮮海帶或海帶下腳料清洗除雜后，60?℃低溫烘干至恒重，粉碎成80~200目粉末，備用；

2）醇提甘露糖醇：將步驟1）中粉末與95wt.%乙醇以固液比為1:25~1:30進行循環(huán)超聲輔助提取，時間50~60min，溫度50~55℃，減壓抽濾，濾渣真空干燥后備用；濾液濃縮后趁熱抽濾，0?℃下析晶，過濾干燥得海帶甘露糖醇產品；

3）酸提褐藻膠及褐藻糖膠：將步驟2）中濾渣與0.1mol·L^-1鹽酸溶液以固液比為1:35~1:50進行循環(huán)超聲輔助提取，時間40~50min，溫度為50~60℃，離心備用；

4）醇沉褐藻膠及褐藻糖膠：將步驟3）中上清液用30~40wt.%乙醇沉淀，離心收集沉淀，無水乙醇洗滌即得褐藻膠，提取完褐藻膠的上清液用60~70wt.%的乙醇沉淀，離心收集沉淀、無水乙醇漂洗即得褐藻糖膠；收集上清液，與步驟3）中濾渣混合濃縮，冷凍干燥備用；?

5）梯度生物轉化：以ACE抑制活性為指標，將步驟4）中冷凍干燥物按固液比1:20~1:40，酶添加量2~8%（w/w）依次加入不同的蛋白酶，按蛋白酶的最佳反應條件可控酶解4~6?h，90?℃滅酶15~20?min，離心收集上清液；沉淀經真空干燥即為海帶膳食纖維粗品；

6）超濾：步驟5）中上清液進行超濾處理，截留10000?Da分子量以下組分，冷凍干燥得海帶降血壓肽；

7）科學配伍：將上述步驟中所得的5個海帶降血壓功能組分進行科學配伍，獲得系列海帶降血壓制品；

8）活性檢測：將步驟7）所制得的海帶降血壓制品進行體外ACE活性抑制檢測，檢測該制品抑制ACE活性的IC₅₀值0.68~1.15mg/g。

所述梯度生物轉化中不同蛋白酶依次可控酶解順序為風味蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶和堿性蛋白酶。

所述工藝，先將海帶中甘露糖醇、褐藻膠、褐藻糖膠等成分采用超聲循環(huán)分步提取，降低其對海帶蛋白酶解的干擾作用，提高水解效率，并實現(xiàn)海帶綜合利用。