[發明專利]一種胡黃連懸浮細胞的快速繁殖方法

在審

• 申請號: 201410463224.6
• 申請日: 2014-09-12
• 公開（公告）號: CN104170748A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 楊存
• 申請（專利權）人: 南京通澤農業科技有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

1.?一種胡黃連懸浮細胞的快速繁殖方法，其特征是：胡黃連的葉片經消毒處理，接種在B₅+6-BA2.5mg/L+IBA0.5mg/L+2,4-D3.0mg/L+DTT10mmol/L培養基上進行愈傷組織誘導培養，將誘導出來的愈傷組織接入培養基B₅+6-BA3.0mg/L+NAA2.0mg/L+2,4-D3.0mg/L培養基中進行愈傷組織增殖培養，增殖培養培養40天后接入B₅+6-BA3.0mg/L+NAA2.0mg/L+2,4-D3.0mg/L+CuCl₂5-15μmol/L+水解酪蛋白80-100mg/L的液體培養基中進行懸浮細胞培養，15天繼代一次，洗滌，60℃烘干至恒重稱量，得干重。

2.?根據權利要求1所述的一種胡黃連懸浮細胞的快速繁殖方法，其特征是：所述的消毒處理為：選用胡黃連幼嫩的葉片，用去污皂刷洗8分鐘，自來水沖洗20分鐘，在超凈工作臺上用3％的次氯酸鈉消毒9分鐘，無菌水沖洗5次。

3.?根據權利要求1所述的一種胡黃連懸浮細胞的快速繁殖方法，其特征是：誘導愈傷組織的培養基中附加了DTT，可以防止愈傷組織的褐化。

4.?根據權利要求1所述的一種胡黃連懸浮細胞的快速繁殖方法，其特征是：誘導愈傷組織的條件為光照強度1000lx，光照7h/d，溫度22℃，濕度40%。

5.?根據權利要求1所述的一種胡黃連懸浮細胞的快速繁殖方法，其特征是：胡黃連懸浮細胞培養中添加了CuCl₂，水解酪蛋白，可以促進懸浮細胞的生長和次生代謝物含量的增加。

6.?根據權利要求1所述的一種胡黃連懸浮細胞的快速繁殖方法，其特征是：愈傷組織的增殖和懸浮細胞的培養條件為光照強度3000lx，光照15h/d，溫度25℃，濕度60%。