[發(fā)明專利]一種柳蘭懸浮細(xì)胞的快速繁殖方法在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201410463061.1 | 申請(qǐng)日: | 2014-09-12 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN104255463A | 公開(kāi)(公告)日: | 2015-01-07 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 楊存 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人: | 南京通澤農(nóng)業(yè)科技有限公司 |
| 主分類(lèi)號(hào): | A01H4/00 | 分類(lèi)號(hào): | A01H4/00 |
| 代理公司: | 暫無(wú)信息 | 代理人: | 暫無(wú)信息 |
| 地址: | 210046 江蘇省南京市*** | 國(guó)省代碼: | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 一種 懸浮 細(xì)胞 快速 繁殖 方法 | ||
1.?一種柳蘭懸浮細(xì)胞的快速繁殖方法,其特征是:柳蘭的種子經(jīng)消毒處理,去掉外種皮接種在1/2WPM+NAA0.1-0.2mg/L+6-BA0.5-1mg/L培養(yǎng)基中進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo),30天后,將誘導(dǎo)出來(lái)的愈傷組織接入培養(yǎng)基WPM+1-2mg/L6-BA+0.3-0.5mg/L2,4-D+150mg/L番茄汁培養(yǎng)基中進(jìn)行繼代培養(yǎng),繼代培養(yǎng)40天后接入附加了150mg/L紅色紅曲酶中進(jìn)行液體懸浮細(xì)胞的培養(yǎng),7-8天繼代一次,取樣,洗滌,烘干。
2.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柳蘭懸浮細(xì)胞的快速繁殖方法,其特征是:所述的消毒處理為:選用柳蘭的種子,在肥皂水中浸泡30min,自來(lái)水沖洗1h,在超凈工作臺(tái)上用0.2%的升汞消毒15min,無(wú)菌水沖洗5遍至無(wú)殘留溶液。
3.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柳蘭懸浮細(xì)胞的快速繁殖方法,其特征是:誘導(dǎo)愈傷組織的條件為暗光照,光照10h/d,溫度21℃。
4.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柳蘭懸浮細(xì)胞的快速繁殖方法,其特征是:柳蘭愈傷組織繼代中添加了番茄汁,可以促進(jìn)細(xì)胞的分裂生長(zhǎng)。
5.?根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種柳蘭懸浮細(xì)胞的快速繁殖方法,其特征是:懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)方法為愈傷組織經(jīng)過(guò)繼代培養(yǎng)之后,挑選嫩綠松散的愈傷組織,放入液體培養(yǎng)基中,加入已消毒滅菌后的玻璃珠震搖,置于震蕩培養(yǎng)箱中進(jìn)行水平震蕩培養(yǎng),振幅2-4cm,震動(dòng)頻率90r/min,溫度23℃,光照2500lx,光期12h/d。
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