[發明專利]一種[18F]AlF標記的PET多肽探針及其制備方法

有效

• 申請號: 201410460832.1
• 申請日: 2014-09-11
• 公開（公告）號: CN104725473B
• 公開（公告）日: 2018-03-20
• 發明（設計）人: 李業森;吳華;張現忠;宋曼莉;郭志德
• 申請（專利權）人: 廈門大學附屬第一醫院;廈門大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/20;C07K1/13
• 代理公司: 廈門市首創君合專利事務所有限公司35204
• 代理人: 張松亭

1.一種[¹⁸F]AlF標記的PET多肽探針，其特征在于：包括連接在一起的TMTP1多肽和NOTA，其結構式如下：

2.一種權利要求1所述的[¹⁸F]AlF標記的PET多肽探針的制備方法，其特征在于：包括如下步驟：

(1)將G-TMTP1溶于DMF中，加入NOTA-NHS ester，然后加入DIEA將pH調節到8.0-8.5，室溫攪拌過夜，經HPLC分離純化，收集目標產物的餾分，合并后凍干，得NOTA-G-TMTP1；

(2)在回旋加速器上用核反應¹⁸O(p,n)¹⁸F制得[¹⁸F]F^-，然后富集在Sep-Park light QMA柱上，用去離子水淋洗以除去吸附在QMA柱上的金屬雜質離子，用生理鹽水洗脫，得到925～1850MBq的¹⁸F生理鹽水溶液；

(3)向反應容器中加入AlCl₃和pH＝4.0的醋酸鈉緩沖液，然后加入步驟(2)制得的¹⁸F生理鹽水溶液，均勻混合，再加入NOTA-G-TMTP1的去離子水溶液，混合物搖勻后在80～110℃反應10～30min，冷卻至常溫，用HPLC測定其標記率，得[¹⁸F]AlF-NOTA-G-TMTP1反應液；

(4)將步驟(3)制備的[¹⁸F]AlF-NOTA-G-TMTP1反應液緩慢注入事先活化過的Sep-Pak C18柱，再用蒸餾水淋洗除去水溶性雜質，吹干后用乙醇淋洗，所得淋洗液用生理鹽水稀釋至乙醇含量小于10％，用HPLC測定其保留時間和放化純，觀察其外觀性狀是否為無色澄清透明液體，即得所述[¹⁸F]AlF標記的PET多肽探針。

3.如權利要求2所述的一種權利要求1所述的[¹⁸F]AlF標記的PET多肽探針的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)為：將10mg G-TMTP1溶于1mL DMF中，加入15mg NOTA-NHS ester，然后加入DIEA將pH調節到8.0-8.5，室溫攪拌過夜，經HPLC分離純化，收集目標產物的餾分，合并后凍干，得NOTA-G-TMTP1。

4.如權利要求3所述的一種權利要求1所述的[¹⁸F]AlF標記的PET多肽探針的制備方法，其特征在于：所述步驟(1)HPLC分離純化中第一流動相為0.1％三氟乙酸水溶液，第二流動相為0.1％三氟乙酸乙腈，梯度洗脫條件，0～10min，95％的第一流動相；10～25min，95％～15％的第一流動相；25～40min，15％的第一流動相；流動相的流速為5mL/min，檢測波長為220nm。

5.如權利要求2所述的一種權利要求1所述的[¹⁸F]AlF標記的PET多肽探針的制備方法，其特征在于：所述步驟(2)為：在回旋加速器上用核反應¹⁸O(p,n)¹⁸F制得[¹⁸F]F^-，然后富集在Sep-Park light QMA柱上，用5mL去離子水淋洗以除去吸附在QMA柱上的金屬雜質離子，用0.2～1mL生理鹽水洗脫，得到925～1850MBq的¹⁸F生理鹽水溶液。

6.如權利要求2所述的一種權利要求1所述的[¹⁸F]AlF標記的PET多肽探針的制備方法，其特征在于：所述步驟(3)為：向反應容器中加入10μL 2nmol/L的AlCl₃和300μL 0.1mol/L pH＝4.0的醋酸鈉緩沖液，然后加入100μL步驟(2)制得的¹⁸F生理鹽水溶液，均勻混合3min，再加入1000μL 1mg/mL的NOTA-G-TMTP1的去離子水溶液，混合物搖勻后在80～110℃反應10～30min，冷卻至常溫，用HPLC測定其標記率，得[¹⁸F]AlF-NOTA-G-TMTP1反應液。

7.如權利要求2所述的一種權利要求1所述的[¹⁸F]AlF標記的PET多肽探針的制備方法，其特征在于：所述步驟(4)為：將步驟(3)制備的[¹⁸F]AlF-NOTA-G-TMTP1反應液緩慢注入事先活化過的Sep-Pak C18柱，再用20mL蒸餾水淋洗除去水溶性雜質，吹干后用800μL乙醇淋洗，所得淋洗液用生理鹽水稀釋至乙醇含量小于10％，用HPLC測定其保留時間和放化純，觀察其外觀性狀是否為無色澄清透明液體，即得所述[¹⁸F]AlF標記的PET多肽探針。