[發明專利]生食水產品寄生蟲的檢測方法

在審

• 申請號: 201410459314.8
• 申請日: 2014-09-10
• 公開（公告）號: CN104215635A
• 公開（公告）日: 2014-12-17
• 發明（設計）人: 張衛兵
• 申請（專利權）人: 南通市衛生監督所;張衛兵
• 主分類號: G01N21/84
• 分類號: G01N21/84
• 代理公司: 南京鐘山專利代理有限公司 32252
• 代理人: 戴朝榮

技術領域

本發明涉及農業和動物檢疫技術領域，具體涉及一種生食水產品寄生蟲的檢測方法。?

背景技術

我國先后有23個省份報道并殖吸蟲感染主要就是生吃溪蟹喇蛄小龍蝦囊蚴而感染《人體寄生蟲學》(第五版，詹希美主編)。異尖線蟲病為海洋自然疫源性疾病，人吃了生的海魚片、魚肝、魚子、烏賊等而感染第三期幼蟲。日本及太平洋地區20多個國家報告病例。國內市售海魚中，新鮮鮐魚、小黃魚、帶魚肌肉異尖線蟲幼蟲檢出率接近100％，對東海黃海30多種海捕魚、軟體動物檢測，帶幼蟲率84％。廣州管圓線蟲，全球報道3000例，中間宿主為田螺、蝸牛、蛙類、福壽螺等，人生吃中間宿主而感染第二三期幼蟲，北京70例。?

目前缺乏一種有效檢測、檢出率高的生食水產品寄生蟲的檢測方法。?

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種有效檢測、檢出率高的生食水產品寄生蟲的檢測方法。?

為了實現上述目的，本發明通過如下技術方案實現：本發明的一種生食水產品寄生蟲的檢測方法，包括如下步驟：?

(1)制備人工消化液：取胃蛋白酶5-50g，溶解于900ml去離子水中，加濃鹽酸7-70ml，再加去離子水至1000ml，充分混勻，放置15-30min后備用；?

(2)制備待測樣品：取生食水產品的肌肉用組織搗碎機打漿粉碎；?

(3)將待測樣品與胃蛋白酶溶液以1:8-1：12的比例置于三角燒瓶中，充分攪拌；?

(4)在35-39℃的水浴箱或恒溫箱中放置4-5h使待測樣品充分消化，用吸管吸去上清液，再加入蒸餾水，攪拌后沉淀20-60min，再吸去上清液，反復清洗，直至上清液透明為止，沉淀備用；?

(5)取上述經處理的沉淀物，在顯微鏡下，邊用蒸餾水稀釋邊用觀察寄生蟲；?

(6)撕開水產品的肌肉后用肉眼直接檢查體積較大的蟲種，必要時鏡檢鑒定。?

進一步地，在步驟(5)中，將沉淀物移至盛有少量生理鹽水的培養皿中，輕微搖動培養皿使沉淀集中于培養皿中部。?

進一步地，在步驟(5)中，所述寄生蟲選自吸蟲囊蚴、線蟲、絳蟲中的一種或幾種的組?

更進一步地，所述線蟲為異尖線蟲幼蟲。?

進一步地，所述絳蟲為闊節裂頭絳蟲或裂頭蚴。?

進一步地，在步驟(3)中，使用攪拌機進行攪拌，所述攪拌機的轉速為500-2000r/min。?

更進一步地，在步驟(5)中，所述顯微鏡的倍數為4×10-10×10。?

有益效果：本發明操作簡單、快速、結果可靠，能夠有效的檢測出寄生蟲。本發明方法顯著縮短了檢測時間，減少了酶的用量，并能在較長時間內保持寄生蟲的存活，檢出率高。適用于對寄生蟲蟲卵特別是吸蟲囊蚴、線蟲、絳蟲的定量檢測，適用的范圍十分廣泛。?

本發明優點在于：本發明通過采取上述促進胃蛋白酶和樣品組織接觸的措施，減少了胃蛋白酶的用量；在實施過程中對寄生蟲傷害小，分離出寄生蟲后，能夠在較長時間段內保持寄生蟲存活，便于后期相關操作；本發明的方法檢出率高，與常規消化法相比無顯著差異。?

(1)本發明的方法與常規消化法相比：1)增加了使用攪拌機對樣品組織塊攪拌的步驟，利用工具加工使樣品組織成為勻漿狀組織液，便于胃蛋白酶液進行消化；?

(2)在攪拌前向樣品組織中加入少量胃蛋白酶液，使之在攪拌過程中能與樣品充分接觸，可縮短酶液的反應時間。?

附圖說明

圖1是異尖線蟲幼蟲的顯微圖；?

圖2是異尖線蟲幼蟲的示意圖；?

圖3是在海魚內臟表面取出異尖線蟲幼蟲的顯微圖；?

圖4是蛙腿皮下組織內的裂頭蚴的顯微圖；?

圖5是曼氏迭宮絳蟲裂頭蚴的顯微圖；?

圖6是衛氏并殖(肺)吸蟲囊蚴的顯微圖。?

具體實施方式

以下通過具體的實施例對本發明的技術方案作進一步描述，但本發明并不限于這些實施例，該領域的技術熟練人員可以根據上述內容對本發明作出一些非本質的改進和調整，都應屬于本發明所附的權利要求的保護范圍。?

實施例1?

如圖1至圖6所示，本發明的一種生食水產品寄生蟲的檢測方法，包括如下步驟：?

(1)制備人工消化液：取胃蛋白酶5g，溶解于900ml去離子水中，加濃鹽酸7ml，再加去離子水至1000ml，充分混勻，放置15min后備用；?

(2)制備待測樣品：取生食水產品的肌肉用組織搗碎機打漿粉碎；?