[發明專利]一種豆渣蛋白質的提取方法及其用于制備DPP?IV抑制肽的方法

有效

• 申請號: 201410455009.1
• 申請日: 2014-09-09
• 公開（公告）號: CN104256047B
• 公開（公告）日: 2017-09-29
• 發明（設計）人: 謝寧寧;黃晶晶;程江華;王灼琛;余麗;王曉莉;王苗苗;李迪龍;趙友成;殷俊峰;閆曉明
• 申請（專利權）人: 安徽省農業科學院農產品加工研究所
• 主分類號: A23J1/14
• 分類號: A23J1/14;C12P21/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.豆渣蛋白質用于制備DPP-IV抑制肽的方法，其特征在于，按如下步驟進行：

(1)按料液比為1∶20～1∶200向豆渣蛋白質中加入水，調節pH值至1.5～10.0；

(2)按蛋白酶與加水之前的豆渣蛋白質比為1∶200～1∶20再加入蛋白酶，調節溫度至20～60℃，進行水解反應0.5～6h，水解反應結束后，滅酶得到水解液；

(3)將水解液離心去除殘渣，獲得的上清液經干燥制得DPP-IV抑制肽粗品粉末；

(4)將DPP-IV抑制肽粗品粉末配成濃度為20-200mg/ml的溶液，然后經過膜分離或柱層析進行進一步的純化得到DPP-IV抑制肽純品；

所述豆渣蛋白的提取方法按如下步驟進行：

a)將新鮮的豆渣按照料液比為1∶10～1∶100加入水，攪拌均勻；

b)將豆渣液放置于30-50℃溫度條件下，放置時間1.0～24h，在此過程中豆渣液的pH值不斷降低，待pH值為3.0-5.0時，將豆渣液取出，室溫下冷卻降溫，此時豆渣液分成三層，最上層為淺黃色漂浮物，中間層為水，最下層為析出的淺黃色蛋白質，采用玻璃容器將最上層的黃色漂浮物棄去；

c)采用2-12層120目以上紗布過濾，除去水，收集紗布上殘留的豆渣蛋白質，將豆渣蛋白質放置于室溫自然晾干。

2.根據權利要求1所述的豆渣蛋白質用于制備DPP-IV抑制肽的方法，其特征在于：所述的步驟(2)中所述的蛋白酶為胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰酶、酸性蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、復合風味蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶、木瓜蛋白酶和菠蘿蛋白酶中的一種或多種的復配。

3.根據權利要求1所述的豆渣蛋白質用于制備DPP-IV抑制肽的方法，其特征在于：所述的步驟(3)中干燥方式為冷凍干燥、真空干燥或噴霧干燥。

4.根據權利要求1所述的豆渣蛋白質用于制備DPP-IV抑制肽的方法，其特征在于：所述的步驟(4)中膜分離采用的膜孔徑有10kDa、5kDa和3kDa，柱層析填料有：SP-葡聚糖凝膠C-25，CM-葡聚糖凝膠C-25，葡聚糖凝膠G-25，葡聚糖凝膠G-15，葡聚糖凝膠G-10；當采用葡聚糖凝膠G-25，葡聚糖凝膠G-15和葡聚糖凝膠G-10時，DPP-IV抑制肽粗品粉末需要用水溶解；當采用SP-葡聚糖凝膠C-25和CM-葡聚糖凝膠C-25，DPP-IV抑制肽粗品粉末需要用乙酸緩沖液溶解。