[發明專利]一種生育三烯酚的分離提純方法

無效

• 申請號: 201410453257.2
• 申請日: 2014-09-05
• 公開（公告）號: CN104262315A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 張源仁;王嘉磊;甄洪峰;魏國華
• 申請（專利權）人: 寧波大紅鷹生物工程股份有限公司
• 主分類號: C07D311/72
• 分類號: C07D311/72;B01J20/10;B01D15/20
• 代理公司: 余姚德盛專利代理事務所(普通合伙) 33239
• 代理人: 胡小永

技術領域

本發明屬于化學工程領域，具體涉及一種生育三烯酚的分離提純方法。

背景技術

維生素E是生育酚和生育三烯酚以及具有d-α-生育酚生理活性的衍生物(如酯類等)的總稱。目前已經從植物資源中分離出4種生育酚(α、β、γ、δ)和4種生育三烯酚(α、β、γ、δ)。生育三烯酚與生育酚結構上的主要區別在于類異戊二烯基側鏈飽和程度不同。生育三烯酚之所以不受重視有兩方面原因：一是在各種生育酚和生育三烯酚中，α-生育酚的生理活性最高，在人體中優先被吸收和利用，而生育三烯酚的生理活性相對較低；二是生育三烯酚的分布不廣，僅存在與單子葉植物(禾本科和棕櫚科)及少數雙子葉植物中發現。

目前，關于生育三烯酚的提取純化研究報道很少，其提取分離的難度在于：容易氧化損失；生育酚與生育三烯酚結構及性質相近，不易分離。其分離提純技術包括：皂化以除去植物油中的酯類物質，但皂化反應需要較高溫度及在堿性條件下進行，生育三烯酚極易被氧化損失，因此需要添加抗氧化劑；超臨界CO₂萃取，該方法能夠有效克服生育三烯酚分離過程中的易氧化、溶劑殘留等缺點，但是所需設備成本較高；柱層析色譜分離能夠對生育酚和生育三烯酚進行粗分離，使大部分生育酚和生育三烯酚進行富集，但是無法使生育酚和生育三烯酚兩者有效分離；制備型液相色譜能夠得到高純度的生育三烯酚，但是該方法成本高、設備要求高、產量小，不適宜工業化。

發明內容

為了克服上述現有技術之不足，本發明提供一種生育三烯酚的分離提純方法，該方法工藝簡單、設備要求低、分離效率高。

本發明所采用的技術方案為，一種生育三烯酚的分離提純方法，具體包括以下步驟：

(1)層析用填料制備：按硅膠：硝酸銀＝2.5～3.5:1(m/m)的比例混合，加入硅膠質量1:1～2(m/v)蒸餾水及1:1.5～3(m/v)乙醇，攪拌混合，減壓蒸餾脫除溶劑，得流動樣粉末于100-120℃烘干16～24h；

(2)柱層析：采用濕法裝柱，將硝酸銀硅膠用非極性溶劑浸泡后一次性轉入層析柱，用所述非極性溶劑作為洗脫劑反復洗脫填料使硝酸銀硅膠沉積壓實，按硝酸銀硅膠質量5％～30％的上柱量將樣品轉移至硅膠頂端，然后按0.5-1BV(柱體積)非極性溶劑、0.5-1BV(柱體積)5％～10％極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液、0.5-1BV(柱體積)50％～100％極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液的順序洗脫樣品；

(3)分段收集洗脫液，根據TLC檢測合并相同組分洗脫液，經濃縮后得到生育三烯酚濃縮液。

優選的，步驟(1)中，按硅膠：硝酸銀＝2.5:1(m/m)的比例混合。

優選的，步驟(2)中的非極性溶劑為正己烷、正庚烷或石油醚。

優選的，步驟(2)中的極性溶劑為乙酸乙酯、四氫呋喃或氯仿。

優選的，步驟(2)中的非極性溶劑為正己烷，極性溶劑為乙酸乙酯。

優選的，步驟(2)中按硝酸銀硅膠質量5％的上柱量將樣品轉移至硅膠頂端。

優選的，步驟(2)中的極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液為乙酸乙酯-正己烷。

優選的，步驟(2)中，按1BV(柱體積)非極性溶劑、1BV(柱體積)10％極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液、1BV(柱體積)50％極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液的順序洗脫樣品。

優選的，步驟(3)中的濃縮為分子蒸餾濃縮。

本發明分離的樣品來源廣泛，既可以來源于棕櫚油和米糠油，也可以來源于谷物加工的下腳料中含有比較豐富的生育三烯酚，含有一定濃度的生育三烯酚的待分離的樣品均適用本發明的方法。樣品來源也可以通過購買得到，如馬來西亞Carotech公司生產的生育三烯酚原料(其中混合生育三烯酚含量25.32％，α-生育酚含量6.9％，另外含有其他成分包括角鯊烯、植物甾醇、輔酶Q10和混合型類胡蘿卜素等)。

相比現有技術，本發明具有如下優勢：

1、柱層析填料采用硝酸銀硅膠，在硝酸銀硅膠的制備過程中，包括硝酸銀與硅膠比例、加入的水和乙醇的比例以及烘干時間等參數，都是申請人經過長期創造性勞動摸索出來的最佳配比；柱層析所采用的上柱量以及多種溶劑體系的依次使用，即采用從非極性溶劑到濃度增加的極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液洗脫，使得有效組分的洗脫更加完全，極大的提高了生育三烯酚的收率；

2、本發明的方法工藝簡單、設備要求低、分離效率高，適宜于工業化。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步描述：

實施例1