[發明專利]一種海洋微生物來源的萘醌類化合物、制備方法及其用途

有效

• 申請號: 201410451707.4
• 申請日: 2014-09-05
• 公開（公告）號: CN104262130A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 王偉毅;李增鵬;陳建明;馮世秀;蘇洋
• 申請（專利權）人: 大豐海洋生物醫藥研究所;王偉毅;李增鵬;馮世秀
• 主分類號: C07C50/34
• 分類號: C07C50/34;C12P7/66;A61P35/00;C12R1/80
• 代理公司: 廈門市精誠新創知識產權代理有限公司 35218
• 代理人: 陳芳

1.一種萘醌類化合物CWL-168，其特征在于，系統命名為1,2,3,4-四氫-1,2,5-三羥基-6,7-二甲氧基-3-甲基-9,10-蒽酮，結構如下式所示，

2.權利要求1所述的萘醌類化合物CWL-168的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

菌種的準備：使用海水PDA培養基，高溫滅菌，制成平板，置于常溫狀態下，接種產黃青霉Penicillium?chrysogenum菌絲體培養，作為菌種；所述海水PDA培養基成分為馬鈴薯200g，葡萄糖20g，瓊脂15-20g，1L海水；

發酵種子液制備：在多個錐形瓶中分別裝入海水PDA液體培養基，高溫滅菌后，接種上述菌種培養，將該培養物作為種子液；

接種：采用固體發酵方式，準備發酵瓶，加入大米固體發酵培養基，高溫滅菌，接種上述種子液，培養；所述大米固體發酵培養基為每1L的三角錐瓶裝大米105g，小黃米45g；

萃取：待真菌發酵成熟后，加入乙醇溶液500mL/瓶浸泡發酵產物，發酵產物溶入乙醇溶液中，浸泡后，將上層乙醇溶液倒出，下層為固體發酵產物；加入新的乙醇溶液500mL/瓶，此步驟反復3次，每次浸泡常溫過夜，如此制備得到乙醇初提液；以乙醇溶液為溶劑，采用高壓乳化切割機分散提取下層的固體發酵產物，得到胞內提取物，然后與所得的乙醇初提液合并，用旋轉蒸發儀濃縮至固態，即得到初級浸膏；

分離：將所得初級浸膏懸浮于水中，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，再將萃取液濃縮后，經硅膠柱層析，以氯仿-甲醇為洗脫劑，從體積比95:5-10:90進行梯度洗脫，其中梯度洗脫下來的組分在薄層層析中能用氯仿-丙酮-冰醋酸體積比為30:10:1溶液系統展開，再經Sephadex?LH-20柱子純化，用氯仿-丙酮體積比為5:2的溶液體系洗脫，洗脫液以15ml為一管，收集20管，挑取其中第9-12管合并，并濃縮至干后得到黃色粉末狀化合物CWL-168。

3.權利要求2所述的萘醌類化合物CWL-168的制備方法，其特征在于，所述萃取中的乙醇溶液為體積分數為70％的乙醇水溶液。

4.權利要求2所述的萘醌類化合物CWL-168的制備方法，其特征在于，所述菌種的準備中，培養條件為28℃下靜置培養4-5天。

5.權利要求2所述的萘醌類化合物CWL-168的制備方法，其特征在于，所述發酵種子液制備步驟中培養條件為28℃下以180rpm/min振蕩培養2-3天。

6.權利要求2所述的萘醌類化合物CWL-168的制備方法，其特征在于，所述接種步驟中培養條件為28℃培養箱放置28天。

7.權利要求1所述的萘醌類化合物CWL-168或權利要求2-6任一所述方法制備得到的萘醌類化合物CWL-168在制備抗腫瘤藥物中的用途。

8.權利要求7所述的在制備抗腫瘤藥物中的用途，其特征在于，所述的腫瘤為人胃癌、人肺癌、小鼠黑色素瘤、人乳腺癌、人胰腺癌、人宮頸癌、人成骨肉瘤、人肝癌、人結腸癌、人喉癌。