[發明專利]朝鮮薊試管實生苗莖尖快繁育苗的方法有效
| 申請號: | 201410449833.6 | 申請日: | 2014-09-04 |
| 公開(公告)號: | CN104145825A | 公開(公告)日: | 2014-11-19 |
| 發明(設計)人: | 李進進;廖俊杰;張建軍;曾佑煒;高陽林 | 申請(專利權)人: | 東莞市睿紳生物技術有限公司;廣東輕工職業技術學院 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245 | 代理人: | 裘暉 |
| 地址: | 523900 廣東省*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 朝鮮 試管 實生苗莖尖快 繁育 方法 | ||
1.一種朝鮮薊試管實生苗莖尖快繁育苗的方法,其特征在于包括如下步驟:
(1)將朝鮮薊(Cynara?scolymus?L.)種子進行物理處理后,再經消毒劑消毒,然后在種子培養基中進行試管內播種、培育,將培育發芽的種子挑出至新鮮的種子培養基中進行自然光照,獲得無菌實生苗;
(2)在無菌條件中進行如下操作,將步驟(1)獲得的無菌實生苗切取0.7~1.0mm的實生苗莖尖轉入叢芽誘導培養基中進行誘導,再轉入自然光照下進行培養,獲得叢芽,然后將叢芽轉至繼代培養基中,經繼代培養后獲得無根苗;
(3)將步驟(2)獲得的無根苗轉至試管生根培養基中,進行試管生根培育獲得朝鮮薊優質種苗。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中所述的消毒劑的組成及消毒條件為75%酒精15s+2%NaClO(10~15)min+1g/L?HgCl2(10~15)min。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中所述的種子培養基的組成為MS培養基+GA3(0~3.0)mg/L+NAA(0~0.2)mg/L+活性炭(0~2)g/L+卡拉膠(6.8~7)g/L+蔗糖30g/L,pH5.5~5.7,其中,NAA為零時,GA3和活性炭均不為零。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)中所述的叢芽誘導培養基的組成為MS培養基+6-BA(2.0~5.0)mg/L+NAA(0.2~0.5)mg/L+KT(0~0.2)mg/L+瓊脂6.8g/L+蔗糖30g/L,pH5.6。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)中所述的繼代培養基的組成為MS培養基+NAA(0~0.5)mg/L+GA3(0~0.5)mg/L+6-BA(0~1.5)mg/L+CM(0~50)g/L+卡拉膠7g/L+蔗糖30g/L,pH5.5~5.7,其中,NAA、GA3、6-BA與CM不能同時為零。
6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(3)中所述的試管生根培養基的組成為1/2MS培養基+IBA(0.2~1.0)mg/L+香蕉泥(0~50)g/L+活性炭(0~2)g/L+瓊脂6.8g/L+蔗糖20g/L,pH5.5~5.8。
7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中所述的物理處理的條件為黑暗條件下30~35℃恒溫浸泡12~24h;
步驟(1)中所述的培育的條件為黑暗條件下,環境溫度23~28℃培育15~25天,培養濕度為70%~85%;
步驟(1)中所述的進行自然光照的條件為23~28℃自然光照30~40天,濕度為70%~85%。
8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)中所述的誘導的條件為黑暗條件下23~28℃誘導培養10~15天;
步驟(2)中所述的自然光照下進行培養的條件為待莖尖膨大1~2倍后轉入培養室自然光下培養15~20天,待開始轉綠而且有芽點出現時適當增加光照強度至2500~3000lux,再培養25~35天。
9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)中所述的繼代培養的條件為溫度23~28℃培養15~25天,濕度為70%~85%,光照強度3000~3500lux。
10.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(3)中所述的生根培育的條件為溫度23~28℃培育20~30天,濕度為70%~85%,光照強度3000~4500lux。
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