[發(fā)明專利]一種冬蟲夏草菌菌絲體發(fā)酵生產(chǎn)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410449700.9
• 申請日: 2014-09-04
• 公開（公告）號: CN104145719A
• 公開（公告）日: 2014-11-19
• 發(fā)明（設計）人: 賀宗毅;陳仕江;賀元川;張德利;魯增輝;李卿
• 申請（專利權(quán)）人: 重慶市中藥研究院
• 主分類號: A01G1/04
• 分類號: A01G1/04
• 代理公司: 重慶輝騰律師事務所 50215
• 代理人: 武小赟

1.一種冬蟲夏草菌菌絲體發(fā)酵生產(chǎn)方法，包括冬蟲夏草菌液態(tài)發(fā)酵專用培養(yǎng)基的制備、菌絲體種源的優(yōu)選和將菌種接入到培養(yǎng)基中發(fā)酵等步驟；其特征在于：菌絲體種源的優(yōu)選為將經(jīng)過10次以上人工傳代后的冬蟲夏草菌種菌絲體接種到人工固體培養(yǎng)基上，遴選出優(yōu)勢子實體，從子實體中分離出優(yōu)選的中華被毛孢菌種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種冬蟲夏草菌菌絲體發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于：所述的菌絲體種源的優(yōu)選包括以下步驟：

1）將蠶蛹或柞蠶蛹用組織勻漿機處理5-10min，篩除未打碎的蛹皮，所得組織液即為蠶蛹或柞蠶蛹組織液；

2）固體基質(zhì)的制備：稱取大米10-40份，玉米粉10-30份，小麥15-35份，高粱10-30份，燕麥粉5-15份，麩皮5-15份；營養(yǎng)液的制備：葡萄糖10-30g/L,蔗糖10-20?g/L，蛋白胨10-20?g/L，酵母膏5-20?g/L，復合氨基酸粉5-20?g/L，磷酸二氫鉀0.1-0.5?g/L，磷酸氫二鉀0.1-0.5?g/L，硫酸鎂0.1-0.5?g/L，維生素B₁?5mg-50mg/L，維生素B₂?5mg-50mg/L，維生素B_6?10mg-50mg/L，蠶蛹或柞蠶蛹組織液50-150g/L；冬蟲夏草菌篩選培養(yǎng)基的制備：將固體基質(zhì)與營養(yǎng)液按重量比例1:1.4-1.8配制即可；

3）用罐頭玻璃瓶盛裝以上篩選培養(yǎng)基，用封口膜封口，121℃滅菌30min，冷卻至室溫，接冬蟲夏草菌液體菌種，每100克篩選培養(yǎng)基接入冬蟲夏草液體菌種的量為10-30ml，菌種均勻分布在培養(yǎng)基表面；

4）將接種后的玻璃瓶置于人工氣候箱中，適宜溫度為15-20℃，空氣相對濕度為50%-75%,避光培養(yǎng)25-30天；

5）待菌絲布滿整個培養(yǎng)基平面后，光照刺激，每天白天光照時間不低于10小時，溫度12-18℃，白晝培養(yǎng)溫度溫差不低于3℃，空氣相對濕度50%-75%；

菌絲經(jīng)光處理后產(chǎn)生橘黃色色素，在培養(yǎng)基表面形成菌蕾，繼續(xù)培養(yǎng)菌蕾生長成子實體；

6）選擇生長為旺盛的子實體，用鑷子從子實體根部鑷取冬蟲夏草子實體，對新鮮的子實體進行組織分離，獲得優(yōu)勢冬蟲夏草菌種。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種冬蟲夏草菌菌絲體發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于所述的蠶蛹或柞蠶蛹為未羽化、體色金黃未黑變的蛹。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種冬蟲夏草菌菌絲體發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于所述的大米、玉米粉、小麥、高粱、燕麥粉、麩皮均為無污染、無變質(zhì)霉變的原料。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種冬蟲夏草菌菌絲體發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于所述的罐頭玻璃瓶高×直徑=12cm×10cm，每瓶中裝固體基質(zhì)80克。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種冬蟲夏草菌菌絲體發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于所述的液體菌種是通過無菌操作將純培養(yǎng)的冬蟲夏草菌接入搖瓶后通過搖瓶液體培養(yǎng)10-18天所得。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種冬蟲夏草菌菌絲體發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于所述的封口膜為15cm×15cm，中央為直徑2cm的圓形、孔徑0.2μm透氣型濾網(wǎng)。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一所述的一種冬蟲夏草菌菌絲體發(fā)酵生產(chǎn)方法，其特征在于人工氣候箱光照強度為150LX-500LX。