[發明專利]一種快速診斷試紙及其制備方法

有效

• 申請號: 201410449056.5
• 申請日: 2014-09-04
• 公開（公告）號: CN104198699A
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發明（設計）人: 岳朋;周錦源;盛威瑋
• 申請（專利權）人: 深圳市領治醫學科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N33/533
• 代理公司: 深圳市精英專利事務所 44242
• 代理人: 任哲夫

1.一種快速診斷試紙，包括底板，以及設于底板上且依次緊密相連的 樣品墊、結合墊、反應膜和吸收墊，所述反應膜上設有檢測區和質控區，其 特征在于：所述結合墊上包被有硝基酪氨酸抗體-熒光顆粒標記物；

所述檢測區上包被有能與待測抗原特異性結合的抗體；

所述質控區上包被有能與硝基酪氨酸抗體特異性結合的抗原。

2.根據權利要求1所述一種快速診斷試紙，其特征在于，所述硝基酪 氨酸抗體-熒光顆粒標記物中，熒光顆粒的粒徑≤40nm，熒光顆粒的熒光波 長為680-720nm或780-820nm。

3.根據權利要求2所述一種快速診斷試紙，其特征在于，所述樣品墊、 結合墊、反應膜和吸收墊分別經過硝基化處理，經硝基化處理后分別為硝基 化樣品墊、硝基化結合墊、硝基化反應膜、硝基化吸收墊。

4.根據權利要求3所述一種快速診斷試紙，其特征在于，檢測區上能 與待測抗原特異性結合的抗體的包被量為10-1000ng/cm²。

5.根據權利要求4所述一種快速診斷試紙，其特征在于，所述反應膜 的質控區上能與硝基酪氨酸抗體特異性結合的抗原的包被量為 10-1000ng/cm²。

6.一種如權利要求1所述快速診斷試紙的制備方法，其特征在于，包 括以下步驟：

S1、在室溫下將熒光顆粒溶液與SMCC溶液混合，溶液中熒光顆粒與SMCC 的質量比為0.1-0.15:48-96，靜置0.5-1.5h，得混合液；然后除去混合液 中的鹽，并向混合液中加入pH為7.0-7.4的磷酸鹽緩沖液至混合液中熒光 顆粒的質量體積濃度為100-300ng/mL，得準備液；

S2、在室溫下，取10-20體積濃度為200-400ng/mL的硝基酪氨酸抗體 溶液，將其與1體積的準備液混合并靜置20-50min，然后除去溶液中的鹽， 得預備液；向預備液中加入2-巰基乙醇以猝滅硝基酪氨酸抗體與熒光顆粒的 結合反應，并用pH為7.0-7.4的磷酸鹽緩沖液將預備液稀釋10-160倍，得 硝基酪氨酸抗體-熒光顆粒標記物噴涂液；

S3、將第一玻璃纖維塊、第二玻璃纖維塊、反應膜和吸收墊依次緊密固 定于底板上；然后將硝基酪氨酸抗體-熒光顆粒標記物噴涂液噴涂于第二玻 璃纖維塊上，形成結合墊；將能與待測抗原特異性結合的抗體噴涂于反應膜 上，形成檢測區；將能與硝基酪氨酸抗體特異性結合的抗原噴涂于反應膜上 形成質控區；所述檢測區位于質控區與結合墊之間；由第一玻璃纖維塊形成 樣品墊；得初型試紙；

S4、將初型試紙置于4℃中干燥1h以上；

S5、用酪蛋白封閉初型試紙上的樣品墊、結合墊、反應膜和吸收墊，制 得試紙。

7.根據權利要求6所述一種快速診斷試紙的制備方法，其特征在于， 在步驟S3前還包括步驟S21，所述步驟S21為：分別將第一玻璃纖維塊、第 二玻璃纖維塊、反應膜和吸收墊浸泡于0.1-1mmol/L的亞硝酸鹽溶液中 5-10min，然后再分別浸泡于0.1-1mol/L的甘露醇溶液中1-10min,接著在 4℃下真空干燥。