[發明專利]一種利用硝酸銀硅膠色譜法提純植物來源角鯊烯的方法

有效

• 申請號: 201410448967.6
• 申請日: 2014-09-04
• 公開（公告）號: CN104262076A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 張源仁;魏國華;肖翔;包方杰;王嘉磊;鄔嫣萍
• 申請（專利權）人: 寧波大紅鷹生物工程股份有限公司
• 主分類號: C07C11/21
• 分類號: C07C11/21;C07C7/12;C07C7/00
• 代理公司: 余姚德盛專利代理事務所(普通合伙) 33239
• 代理人: 胡小永

技術領域

本發明屬于化學工程領域，具體涉及一種有工業化價值的，有效提取植物來源角鯊烯的色譜方法。

背景技術

角鯊烯常溫下為無色油狀液體，是一種高度不飽和的脂肪族烴類化合物。其最初是從鯊魚的肝油中發現的，1914年被命名為Squalene，其化學名稱為2,6,10,15,19,23-六甲基-2,6,10,14,18,22-二十四碳六烯，屬于開鏈三萜，也稱鯊烯。角鯊烯不僅具有促進新陳代謝、活化細胞、強化內臟的作用，還具有強烈的抗氧化作用，能有效防止細胞的老化和癌變，抗癌、防癌，提高機體免疫力。目前，角鯊烯主要來自于深海鯊魚肝油，同時也少量存在于油脂不皂化物中，尤其在橄欖油、棕櫚油及其脫臭餾出物種含量較多，菜籽油、大豆油、米糠油、棉籽油等植物油也含有一定量的角鯊烯。

深海鯊魚生長周期長、繁殖率低，來源困難，因此從植物資源中中尋找角鯊烯具有重大現實意義。然而，植物來源的角鯊烯面臨一個重大缺陷，角鯊烯在植物中的含量極低，大約以重量計算占比為0.1％到0.7％。因此，角鯊烯的純化技術是植物來源角鯊烯工業化的至關重要的一環。

植物來源角鯊烯的提取方法，據檢閱目前可查的文獻，大致可以歸納為以下幾種：一種是利用原料中角鯊烯與雜質的沸點差來進行精餾或分子蒸餾(CN?102089263A、US20130209510A1)；一種是利用萃取的方法(CN101830770A、CN102146014A)；一種是利用普通硅膠柱進行層析，得到高含量的角鯊烯(CN167005A、CN102161611A)。以上這些方法，都存在一定的局限，不適合工業化放大。

第一種方法的代表為索菲姆公司申請的CN?102089263A專利，公布了一種“植物油的脫臭餾出物和/或物理精煉冷凝物中所含的角鯊烯、甾醇和維生素E的提取方法”，本方法是采用三次相繼的精餾，通過沸點差，來分離純化角鯊烯，可現實問題在于，此方法提及的原料中角鯊烯的含量很低，大約在5％左右，而且角鯊烯的沸點與維生素E相差無幾，所以這種通過三次精餾的方法，分離得到的角鯊烯不僅能耗高，而且含量也只能達到此專利中所提到的23％左右，無明顯的工業化價值。

第二種方法的代表是天津大學所申請的CN101830770A專利——從植物油脫臭餾出物中提取角鯊烯的方法，則公開了一種利用分子蒸餾與萃取、結晶相結合的工藝方法，具體步驟是先將原料進行皂化反應，將萃取得到的不皂化物經過兩次分子蒸餾后，以第二次蒸餾的餾出物為原料進行冷析結晶獲得植物甾醇，濾液中回收角鯊烯及混合生育酚，再經多級溶劑萃取在兩相中分別富集角鯊烯及維生素E。此專利提及的實施例3表明，純化4.9g的角鯊烯粗品(含量為36.5％)，需要用到甲醇/正己烷(V正己烷：V甲醇＝1：1)50ml，接下來的三次萃取，用到75ml的正己烷和75ml的甲醇，整個萃取過程共耗用200ml的溶劑，得到2.37g角鯊烯產品(含量為68.7％)，即相當于每1g角鯊烯產品(含量為68.7％)，耗用84ml的溶劑，如此大的溶劑消耗量，基本上沒有工業化價值。

第三種方法是利用硅膠柱的極性選擇特性來進行角鯊烯的分離純化，如公開號為CN167005A的中國專利——植物角鯊烯及其制備方法：具體是一種羅漢果角鯊烯的制備，先從羅漢果的種仁或種籽中提取得到角鯊烯粗品，然后通過硅膠柱層析法制得純度達95％的羅漢果角鯊烯。中國煙草總公司廣東省公司和華南農業大學共同申請的CN102161611A專利——一種以煙草為原料制備角鯊烯的方法，則是通過先用有機溶劑從煙草原料中浸取出角鯊烯粗品，然后將粗品過硅膠層析柱，洗脫液出去有機溶劑后，即得角鯊烯精品，含量為95％左右。此種方法的優點在于，所得角鯊烯產品純度較高、溶劑可精餾后循環套用，硅膠可重復使用，但其缺陷也很明顯，由于植物來源的角鯊烯原料中還有大量的油脂類物質、蠟質，其極性與角鯊烯非常接近，因此要得到高含量的角鯊烯，則上樣量必然很小，而對于工業化生產來說，沒有客觀的上樣量，就沒有實際應用價值。

自1930s’Lucas和Nichols等人報道銀離子可以與烯烴類(π電子)形成絡合物后，研究銀離子色譜分離方法的熱潮歷久不衰，用這種方法，可以非常方便而有效地對烯烴進行分離純化。不過，這種方法還是主要作為一種分析手段來應用，主要原因在于以下幾點：1、銀離子對光非常敏感，銀離子色譜法的工業化應用受到限制；2、銀離子屬于重金屬離子，在工業化生產中有可能泄露到產品中去。所以，到目前為止，還沒有見過真正使用銀離子色譜作為角鯊烯工業化分離的報道。

發明內容