[發明專利]一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法

在審

• 申請號: 201410446383.5
• 申請日: 2014-09-04
• 公開（公告）號: CN104193709A
• 公開（公告）日: 2014-12-10
• 發明（設計）人: 張金芳;楊存
• 申請（專利權）人: 南京標科生物科技有限公司
• 主分類號: C07D309/32
• 分類號: C07D309/32
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術領域

本發明屬于天然產物提純領域，涉及一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法。

背景技術

草藥療法在治療的同時更注重養身，目前草藥療法已在世界各國比較流行，歐亞許多國家用草藥制成補充物投入市場，據研究統計，在美國，大約有500萬人服用各種草藥制成的補充物。

胡椒科植物卡瓦胡椒中的醉椒素具有抗焦慮、鎮靜催眠、局部麻醉、抗驚厥等作用?,且未觀察到藥物依賴性等優點而在歐洲和美國臨床應用。早在1990年，德國聯邦衛生局就批準卡瓦胡椒用于治療焦慮癥，目前英國將其收入《植物藥典》，美國將其收入新版《美國藥典》，歐美許多國家將卡瓦胡椒列為非處方藥或處方藥。

目前國內現有的提取醉椒素的工藝很少，如專利《卡瓦胡椒提取物及其制備方法》(申請號200810057147.9)中公開的工藝步驟是將卡瓦胡椒分揀-清洗-干燥-粉碎-醇提，殘渣重復一次上述步驟，提取液減壓濃縮，混合粉碎即得卡瓦胡椒提取物。該方法提取醉椒素產品純度太低，不適合用于藥物合成。

發明內容

本發明的目的在于提供一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種利用高效逆流色譜純化醉椒素的方法，其特征在于包括以下步驟：

a.取卡瓦胡椒干燥品粉碎過40目篩，加8-10倍量乙醇超聲提取，加入活性炭脫色，過濾；

b.濾液超濾除雜，納濾濃縮，放置析出結晶；

c.將上述濃縮液以乙酸乙酯-乙醇-水為溶劑系統，用高效逆流色譜分離，根據ELSD檢測圖收集目標流分。

所述步驟a中，乙醇濃度80%-90%，活性炭量為溶液量的1%-5%，超聲頻率為40-65KHz，超聲時間為20-60min，提取1-2次。

所述步驟b中，超濾膜為10000-30000D的中空纖維式聚砜膜，進口壓力為0.1-0.3MPa，納濾膜為200-300D的中空纖維式聚砜膜，進口壓力為1.0-2.2MPa。

所述步驟c中，乙酸乙酯-乙醇-水的比例為2-3：4-6：3-5，上相為流動相，下相為固定相。

所述步驟c中，將固定相充滿逆流色譜柱，調整主機轉速800-1000rpm，再將流動相泵入色譜柱，平衡后調整流速1-3ml/min，同時取流動相溶解粗濃縮液，進樣閥進樣。

具體實施方式

下面結合實施例對本發明作進一步詳細的描述，但本發明的實施方式不限于此。

實施例1：

取干燥的卡瓦胡椒1kg，粉碎，過40目篩，加入8倍量80%的乙醇超聲提取30min，提取2次，超聲頻率為40KHZ，加入溶液量1%活性炭脫色，過濾。濾液先后經10000D中空纖維式聚砜膜超濾除雜，進口壓力為0.1MPa，200D中空纖維式聚砜膜納濾濃縮，進口壓力為1.0MPa，得到濃縮液。

將乙酸乙酯-乙醇-水按2：4：3體積比混合，超聲搖勻，靜置分層后分離，下相為固體相，上相為流動相，濃縮液用上相溶解，將固定相泵滿色譜柱，然后調整主機轉速為800rmp，再以3ml/min流速泵入流動相，待柱內溶劑系統建立動態平衡后，由進樣閥進樣，然后根據檢測器譜圖接收目標流分，蒸干即得醉椒素產品13.8g，含量95.3%。

實施例2：

取干燥的卡瓦胡椒2kg，粉碎，過40目篩，加入10倍量90%的乙醇超聲提取40min，提取1次，超聲頻率為60KHZ，加入溶液量3%活性炭脫色，過濾。濾液先后經經20000D中空纖維式聚砜膜超濾除雜，進口壓力為0.3MPa，300D中空纖維式聚砜膜納濾濃縮，進口壓力為2.2MPa，得到濃縮液。

將乙酸乙酯-乙醇-水按3：6：5體積比混合，超聲搖勻，靜置分層后分離，下相為固體相，上相為流動相，濃縮液用上相溶解，將固定相泵滿色譜柱，然后調整主機轉速為1000rmp，再以2ml/min流速泵入流動相，待柱內溶劑系統建立動態平衡后，由進樣閥進樣，然后根據檢測器譜圖接收目標流分，蒸干即得醉椒素產品31.2g，含量97.4%。