[發明專利]同源四倍體七葉一枝花植株的培育方法

有效

• 申請號: 201410445856.X
• 申請日: 2014-09-03
• 公開（公告）號: CN104160962A
• 公開（公告）日: 2014-11-26
• 發明（設計）人: 王曉娟
• 申請（專利權）人: 無錫中農科生物育種技術研究院有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種同源四倍體七葉一枝花植株的培育方法，其特征在于：步驟如下：

(1)繁育組培苗：取七葉一枝花植株的葉芽，通過植物組織培養技術，繁育出組培苗；

(2)秋水仙素處理：用以下兩種方法之一處理：

①在無菌條件下，選取組培繼代苗，在莖部造成若干創傷，然后用脫脂棉包裹嚴密，再在脫脂棉上滴入質量濃度為0.03％～0.05％的秋水仙素溶液浸潤，在分化培養基上培養10～15天后，用無菌水洗凈，切成單芽后轉接到叢生芽誘導培養基中；

②將組培苗轉接至添加質量濃度為0.05％～1.0％的秋水仙素的分化培養基中，培養20～30天后，切成單芽轉接至叢生芽誘導培養基中；

所述分化培養基的組份組成為：MS+BA?0.5～0.8mg/L+GA₃?0.1～0.5mg/L+NAA?0.1～0.3mg/L+CTK?0.3～0.5mg/L；

所述在分化培養基中培養的培養條件為：溫度25～30℃，每天日照8～12h，光照強度60μmol·m^-2·s^-1；

所述叢生芽誘導培養基的組分組成為：MS+BA?1.5～2.0mg/L+GA₃?0.1～0.5mg/L+NAA?0.1～0.5mg/L+蔗糖20～30g/L；

(3)誘導植株分化培養：在叢生芽誘導培養基中培養25～35天，誘導產生叢生芽，培養條件為：溫度20～30℃，每天日照8～12h，光照強度120μmol·m^-2·s^-1；

(4)誘導植株增殖培養：將上述長出的叢生芽轉接入增殖培養基中，在溫度20～30℃，每天日照8～12h，光照強度120μmol·m^-2·s^-1的條件下，培養25～35天，將叢生芽分株培養成完整植株；

所述增殖培養基的組分組成為：MS+BA?2.0～3.0mg/L+NAA?0.2～0.5mg/L+蔗糖20～30g/L；

(5)誘導植株染色體檢測：切取步驟(4)中得到的完整植株，在解剖鏡下剝離莖尖，經過壓片染色，在顯微鏡下進行染色體數目檢測；

(6)選育同源四倍體植株：通過染色體數目檢測，篩選出四倍體植株，轉接至生根培養基中，在溫度25～30℃，每天日照8～12h，光照強度120μmol·m^-2·s^-1的條件下，培養25～35天，即培育出同源四倍體完整植株；

所述生根培養基的組份組成為：1/2MS+NAA?0.1～0.3mg/L+蔗糖20～30g/L。

2.根據權利要求1所述的同源四倍體七葉一枝花植株的培育方法，其特征在于：所述分化培養基的組份組成為：MS+BA?0.6mg/L+GA₃?0.3mg/L+NAA?0.2mg/L+CTK?0.4mg/L。

3.根據權利要求1所述的同源四倍體七葉一枝花植株的培育方法，其特征在于：所述叢生芽誘導培養基的組分組成為：MS+BA?1.8mg/L+GA₃?0.3mg/L+NAA?0.3mg/L+蔗糖25g/L。

4.根據權利要求1所述的同源四倍體七葉一枝花植株的培育方法，其特征在于：所述增殖培養基的組分組成為：MS+BA?2.5mg/L+NAA?0.3mg/L+蔗糖25g/L。

5.根據權利要求1所述的同源四倍體七葉一枝花植株的培育方法，其特征在于：所述生根培養基的組份組成為：1/2MS+NAA?0.2mg/L+蔗糖25g/L。