[發明專利]一種直接檢測A+B型流感病毒的實時熒光RT-PCR方法無效
| 申請號: | 201410438234.4 | 申請日: | 2014-08-29 |
| 公開(公告)號: | CN104164518A | 公開(公告)日: | 2014-11-26 |
| 發明(設計)人: | 于洪波;陳善光;歐陽輝;吳清華 | 申請(專利權)人: | 深圳市梓健生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/70 | 分類號: | C12Q1/70;C12Q1/68;C12R1/93 |
| 代理公司: | 深圳中一專利商標事務所 44237 | 代理人: | 張全文 |
| 地址: | 518000 廣東省深圳*** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 直接 檢測 流感病毒 實時 熒光 rt pcr 方法 | ||
1.一種直接檢測A型、B型流感病毒的實時熒光RT-PCR試劑盒,所述試劑盒包含有RT-PCR反應液,其特征在于,所述RT-PCR反應液為具有A型、B型流感病毒裂解功能的RT-PCR反應液。
2.如權利要求1所述的直接檢測A型、B型流感病毒的實時熒光RT-PCR試劑盒,其特征在于,所述RT-PCR反應液為包含有表面活性劑的RT-PCR反應液。
3.如權利要求1或2所述的直接檢測A型、B型流感病毒的實時熒光RT-PCR試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包含有擴增A型流感病毒的上游引物、下游引物,以及A型流感病毒熒光探針;
所述A型流感病毒上游引物具有序列表SEQ.ID.No.1的堿基序列;
所述A型流感病毒下游引物具有序列表SEQ.ID.No.2的堿基序列;
所述A型流感病毒熒光探針具有序列表SEQ.ID.No.5的堿基序列,且所述A型流感病毒熒光探針的5’端標記有熒光報告基團、3’端標記有熒光淬滅基團。
4.如權利要求1或2所述的直接檢測A型、B型流感病毒的實時熒光RT-PCR試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包含有擴增B型流感病毒的上游引物、下游引物,以及B型流感病毒熒光探針;
所述B型流感病毒上游引物具有序列表SEQ.ID.No.3的堿基序列;
所述B型流感病毒下游引物具有序列表SEQ.ID.No.4的堿基序列;
所述B型流感病毒熒光探針具有序列表SEQ.ID.No.6的堿基序列,且所述B型流感病毒熒光探針的5’端標記有熒光報告基團、3’端標記有熒光淬滅基團。
5.如權利要求1或2所述的直接檢測A型、B型流感病毒的實時熒光RT-PCR試劑盒,其特征在于,所述試劑盒中還包括有陽性對照,所述陽性對照為連有A型流感病毒基因片段的載體、和/或連有B型流感病毒基因片段的載體。
6.一種直接檢測A型、B型流感病毒的實時熒光RT-PCR方法,其特征在于,在RT-PCR過程中的RT-PCR反應液為具有流感病毒裂解功能的RT-PCR反應液。
7.如權利要求6所述的直接檢測A型、B型流感病毒的實時熒光RT-PCR方法,其特征在于,RT-PCR過程中采用擴增所述A型流感病毒上游引物為具有序列表SEQ.ID.No.1的堿基序列,下游引物為具有序列表SEQ.ID.No.2的堿基序列;
以及,RT-PCR過程中采用A型流感病毒熒光探針為具有序列表SEQ.ID.No.5的堿基序列,且所述A型流感病毒熒光探針的5’端標記有熒光報告基團、3’端標記有熒光淬滅基團。
8.如權利要求6所述的直接檢測A型、B型流感病毒的實時熒光RT-PCR方法,其特征在于,RT-PCR過程中采用擴增B型流感病毒的上游引物為具有序列表SEQ.ID.No.3的堿基序列,下游引物為具有序列表SEQ.ID.No.4的堿基序列;
以及,RT-PCR過程中采用B型流感病毒熒光探針具有序列表SEQ.ID.No.6的堿基序列,且所述B型流感病毒熒光探針的5’端標記有熒光報告基團、3’端標記有熒光淬滅基團。
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