[發明專利]一種大豆苷的分離純化方法

有效

• 申請號: 201410438060.1
• 申請日: 2014-08-29
• 公開（公告）號: CN105367615B
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發明（設計）人: 楊義芳;孫百玲;胡曉;謝欣辛;黃春躍
• 申請（專利權）人: 上海醫藥工業研究院;中國醫藥工業研究總院
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦

本發明公開了一種大豆苷的分離純化方法，包括以下步驟：以乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水所組成的四元溶劑體系作為分離溶劑體系，采用高速離心分配色譜法對葛根黃酮提取物進行分離純化，即可；所述的四元溶劑體系中，所述的乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水的體積比為20:(3?5):(2?3):(20?25)；所述的高速離心分配色譜法在高速離心分配色譜儀中進行。本發明大豆苷的分離純化方法，分離時間短、分離能力強、分離到的大豆苷純度高，并且溶劑消耗量小。

技術領域

本發明涉及一種大豆苷的分離純化方法。

背景技術

葛根為豆科植物葛Puerarialobata(Willd.)Ohwi的干燥根，習稱野葛，系常用中藥，具有解肌退熱，生津止渴，透疹，升陽止瀉，通經活絡，解酒毒之功效。葛根含有多種有效成分，其中黃酮類化合物是其主要有效成分。葛根黃酮藥理活性十分廣泛，如其中的主要化合物葛根素具有降血脂，抗炎，抗心律失常、對心肌缺血的保護作用、腎保護、抗氧化、抗缺血再灌注損傷、抗肝缺血再灌注損傷、抗酒精中樞抑制、調控骨代謝、降血糖、利尿等作用。

隨著葛根黃酮的藥理作用的研究深入，對葛根黃酮的分離純化也越來越受到人們的重視，而目前人們主要關注的是葛根素及大豆苷元的分離純化研究，而對葛根中另一黃酮類成分大豆苷研究的文獻及專利均較少，其大豆苷的結構式如下：

目前，現有技術中的分離純化技術仍比較落后，多采用傳統分離純化方法，如系統溶劑法、萃取法、柱色譜法等，而這些方法多存在步驟繁瑣、周期長、效率低、溶劑消耗量大等缺點，因此開發一種高效、環保的分離純化方法有望成為研究熱點。

發明內容

本發明要解決的技術問題是為了克服現有技術中大豆苷的分離純化方法分離純化效果差、步驟繁瑣、周期長、效率低、溶劑消耗量大等缺陷，提供一種完全新的從大豆苷的分離純化單體的方法。本發明方法能夠得到較高純度(大于92.5％)的大豆苷單體純品，能夠實現一步分離純化，適用于不同的葛根黃酮粗品，并能夠快速、高效地實現分離。

本發明提供了一種大豆苷的分離純化方法，包括以下步驟：以乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水所組成的四元溶劑體系作為分離溶劑體系，采用高速離心分配色譜法對葛根黃酮提取物進行分離純化，即可；其中，所述的四元溶劑體系中，所述的乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水的體積比為20:(3-5):(2-3):(20-25)；所述的高速離心分配色譜法在高速離心分配色譜儀中進行。

本發明中，所述的葛根黃酮提取物是指按本發明常規提取法提取葛根得到的葛根黃酮提取物，一般采用普通超聲提取法、循環超聲提取法或者回流提取法提取葛根即可得葛根黃酮粗提物。本發明中，所述的葛根黃酮提取物(按葛根素含量計)其純度可以為5％～75％，所述的純度是指葛根素的質量占葛根黃酮粗提物總質量的百分比。

本發明中，所述的高速離心分配色譜法(Fast centrifugal partitionchromatography，FCPC)是屬于現代逆流色譜的范疇，是一種液液分配技術，它利用不同物質在兩相不混溶的溶液中的分配系數不同，經過類似連續萃取的過程，對物質進行分離。如今FCPC已廣泛應用于化學、醫藥、農業、石油、生物工程、食品工程等十幾個領域，尤其在天然活性產物分離純化方面應用廣泛，并成功分離多種化合物。

本發明中，所述的高速離心分配色譜儀為本領域常規的高速離心分配色譜儀，一般轉速可調節600-2000r/min的高速離心分配色譜儀都可以，較佳地為轉速可調節1000-1800r/min的高速離心分配色譜儀，更佳地為法國RousseletRobatel型號為FCPC A的高速離心分配色譜儀。

本發明中，所述的高速離心分配色譜法較佳地包括如下步驟：

(1)S₁、將所述的四元溶劑體系混合均勻、分層，取下層溶液作為高速離心分配色譜法中的固定相，取上層溶液作為高速離心分配色譜法中的流動相；