[發(fā)明專利]一種大豆苷的分離純化方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410438060.1
• 申請日: 2014-08-29
• 公開（公告）號: CN105367615B
• 公開（公告）日: 2019-03-19
• 發(fā)明（設計）人: 楊義芳;孫百玲;胡曉;謝欣辛;黃春躍
• 申請（專利權(quán)）人: 上海醫(yī)藥工業(yè)研究院;中國醫(yī)藥工業(yè)研究總院
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08
• 代理公司: 上海弼興律師事務所 31283
• 代理人: 薛琦

1.一種大豆苷的分離純化方法，包括以下步驟：以乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水所組成的四元溶劑體系作為分離溶劑體系，采用高速離心分配色譜法對葛根黃酮提取物進行分離純化，即可；其中，所述的四元溶劑體系中，所述的乙酸乙酯、正丁醇、乙醇和水的體積比為20:(3-5):(2-3):(20-25)；所述的高速離心分配色譜法在高速離心分配色譜儀中進行；

所述的高速離心分配色譜法包括如下步驟：

(1)S₁、將所述的四元溶劑體系混合均勻、分層，取下層溶液作為高速離心分配色譜法中的固定相，取上層溶液作為高速離心分配色譜法中的流動相；

S₂、制備樣品：將葛根黃酮提取物溶解于混合溶液中；其中，所述的混合溶液是所述四元溶劑體系混合分層后的下層溶液和上層溶液各取一部分后混合而得的；

步驟S₁、S₂順序不分先后；

(2)固定相加入至所述高速離心分配色譜儀后，加入流動相，達到體系平衡；

(3)將樣品加入至高速離心分配色譜儀分離純化，即可；

所述的混合溶液中，所述的下層溶液和所述上層溶液的體積比為1:1-1:5；

所述的樣品中所述葛根黃酮提取物和混合溶液的質(zhì)量體積比為7-15mg/ml。

2.如權(quán)利要求1所述的分離純化方法，其特征在于，所述的高速離心分配色譜儀為轉(zhuǎn)速可調(diào)節(jié)1000-1800r/min的高速離心分配色譜儀。

3.如權(quán)利要求1所述的分離純化方法，其特征在于，所述的高速離心分配色譜儀為法國RousseletRobatel型號為FCPC A的高速離心分配色譜儀。

4.如權(quán)利要求1所述的分離純化方法，其特征在于，步驟(2)中，所述流動相的流速為2.0-7.0mL/min。

5.如權(quán)利要求1所述的分離純化方法，其特征在于，步驟S₁所述的下層溶液還經(jīng)過過濾、超聲處理后作為高速離心分配色譜法中的固定相；所述的上層溶液還經(jīng)過過濾、超聲處理后作為高速離心分配色譜法中的流動相。

6.如權(quán)利要求5所述的分離純化方法，其特征在于，所述的過濾為微孔濾膜過濾；所述的超聲處理的頻率為16-28KHz，超聲處理的時間為15-30min。

7.如權(quán)利要求6所述的分離純化方法，其特征在于，所述濾膜的孔徑為0.3-0.5μm。

8.如權(quán)利要求6所述的分離純化方法，其特征在于，所述濾膜的孔徑為0.45μm。

9.如權(quán)利要求1所述的分離純化方法，其特征在于，步驟(1)中所述的混合溶液中，所述的下層溶液和所述上層溶液的體積比為為1:4。

10.如權(quán)利要求1所述的分離純化方法，其特征在于，所述的樣品還經(jīng)過濾后，再加入至高速離心分配色譜儀進行分離純化；其中，所述的過濾為微孔濾膜過濾，濾膜的孔徑為0.3-0.5μm。

11.如權(quán)利要求4所述的分離純化方法，其特征在于，所述的流動相的流速為2.0-3.0mL/min。

12.如權(quán)利要求1所述的分離純化方法，其特征在于，步驟(2)中，加入固定相的時候，固定相的流速為20-50ml/min，所述的高速離心分配色譜儀的轉(zhuǎn)速為600-800rpm/min；當加入流動相的時候，所述的高速離心分配色譜儀的轉(zhuǎn)速提高至1200-1500r/min。

13.如權(quán)利要求1所述的分離純化方法，其特征在于，步驟(3)分離純化后還進行去除溶劑過程和干燥過程。

14.如權(quán)利要求13所述的分離純化方法，其特征在于，所述去除溶劑過程為在壓強-0.01-0.08MPa、溫度70-75℃條件下進行去除溶劑；所述的干燥過程中的溫度為60-65℃。