[發明專利]一種黃瓜游離小孢子的滅菌方法

有效

• 申請號: 201410437096.8
• 申請日: 2014-08-29
• 公開（公告）號: CN104304001B
• 公開（公告）日: 2017-01-11
• 發明（設計）人: 劉立功;張峰;王晶;于拴倉;趙泓;李軍
• 申請（專利權）人: 北京市農林科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京五洲洋和知識產權代理事務所(普通合伙)11387
• 代理人: 劉春成

1.一種黃瓜游離小孢子的滅菌方法，其特征在于：該方法將黃瓜花蕾進行消毒處理步驟、小孢子釋放處理步驟、小孢子離心處理步驟，得到無菌的純化小孢子；所述小孢子離心處理步驟使用的滅菌提取液中含有抗菌劑。

2.根據權利要求1所述黃瓜游離小孢子的滅菌方法，其特征在于：所述抗菌劑為植物組培抗菌劑。

3.根據權利要求1或2所述黃瓜游離小孢子的滅菌方法，其特征在于：所述滅菌提取液中，抗菌劑的質量體積比為0.2-0.3％。

4.根據權利要求3所述黃瓜游離小孢子的滅菌方法，其特征在于：所述滅菌提取液為：以基本提取液為基礎，添加質量體積比為0.2-0.3％的抗菌劑。

5.根據權利要求4所述黃瓜游離小孢子的滅菌方法，其特征在于：所述基本提取液是以B5基本培養基為基礎，添加質量體積比為10-14％的蔗糖。

6.根據權利要求5所述黃瓜游離小孢子的滅菌方法，其特征在于：

所述花蕾消毒處理步驟為：將黃瓜花蕾依次用酒精溶液和次氯酸鈉溶液消毒，再用無菌水沖洗，得到消毒后的花蕾；

所述小孢子釋放處理步驟為：將所述消毒后的花蕾加入基本提取液，再進行擠壓處理、過篩處理，得到小孢子濾液；

所述小孢子離心處理步驟為：將所述小孢子濾液進行第一輪離心處理，保留沉淀，再加入所述滅菌提取液；再進行振蕩處理、第二輪離心處理，保留沉淀，得到所述無菌的純化小孢子。

7.根據權利要求6所述黃瓜游離小孢子的滅菌方法，其特征在于：

所述小孢子離心處理步驟中，所述振蕩處理的時間為20-40min，轉速為30-50rpm。

8.根據權利要求6或7所述黃瓜游離小孢子的滅菌方法，其特征在于：

所述小孢子離心處理步驟中，所述第一輪離心處理的轉速為500-1000rpm，時間為2-5min。

9.根據權利要求6或7所述黃瓜游離小孢子的滅菌方法，其特征在于：

所述小孢子離心處理步驟中，所述第二輪離心處理的轉速為500-1000rpm，時間為2-5min。

10.根據權利要求1所述黃瓜游離小孢子的滅菌方法，其特征在于：所述滅菌方法適用的黃瓜品種為“中農26”、“津優35”、“北京403”、“粵秀1號”。