[發明專利]基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒及其使用方法

無效

• 申請號: 201410432604.3
• 申請日: 2014-08-28
• 公開（公告）號: CN104215755A
• 公開（公告）日: 2014-12-17
• 發明（設計）人: 曾慶輝
• 申請（專利權）人: 中國科學院長春光學精密機械與物理研究所
• 主分類號: G01N33/532
• 分類號: G01N33/532;G01N21/64
• 代理公司: 長春菁華專利商標代理事務所 22210
• 代理人: 王丹陽

1.基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括蛋白、EDC縮合劑、核殼量子點、能與所述蛋白特異性結合的待測抗原第一抗體和包被待測抗原第二抗體的微孔板；

所述蛋白為蛋白G或者蛋白A，所述核殼量子點為CdTe/CdS、CdSe/CdS、CdSe/ZnSe或CdSe/ZnS。

2.根據權利要求1所述的基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括緩沖液。

3.根據權利要求1所述的基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述包被待測抗原第二抗體的微孔板可以由微孔板和待測抗原的第二抗體替代。

4.根據權利要求3所述的基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括1％的脫脂奶粉。

5.根據權利要求1所述的基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述第一抗體為乙肝表面抗體或者乙肝e抗體，第二抗體為乙肝表面抗體或者乙肝e抗體。

6.根據權利要求1所述的基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述蛋白、EDC縮合劑、核殼量子點的物質的量比為1:(100-200):1。

7.根據權利要求1所述的基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述蛋白、能與所述蛋白特異性結合的待測抗原第一抗體的物質的量比為1:1，所述待測抗原第二抗體的物質的量大于等于蛋白的物質的量。

8.權利要求1-2、5-7任何一項所述的基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將蛋白和核殼量子點在EDC縮合劑的作用下進行共價連接，得到核殼量子點標記的蛋白；

(2)將步驟(1)得到的核殼量子點標記的蛋白與能與該蛋白特異性結合的待測抗原第一抗體混合，得到量子點抗體柔性偶聯標記產物；

(3)將含有待測抗原的待測液加入包被待測抗原第二抗體的微孔板中，進行免疫反應，洗滌后，再向微孔板中加入量子點抗體柔性偶聯標記產物，進行免疫反應，洗滌后，得到涂有標記產物的微孔板；

(4)檢測涂有標記產物的微孔板中核殼量子點的熒光強度，通過與空白樣品的熒光光譜進行對比，得到待測抗原的濃度。

9.根據權利要求8所述的基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，當包被待測抗原第二抗體的微孔板由微孔板和待測抗原的第二抗體替代時，步驟(3)前還包括，將待測抗原第二抗體加入微孔板中，反應后，加入1％的脫脂奶粉封閉微孔板的位點，洗滌，得到包被待測抗原第二抗體的微孔板。

10.根據權利要求8或9所述的基于核殼量子點柔性偶聯標記物的免疫檢測試劑盒，其特征在于，所述步驟(2)在23-25℃反應30-60min；所述步驟(3)中免疫反應的溫度均為37℃，時間均為0.5-1h。