[發(fā)明專利]多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410431759.5
• 申請(qǐng)日: 2014-08-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104195247A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-12-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳華云;肖湘文;丁渭;劉淑園;陳嘉昌;方鳳銀;趙麗
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣州和實(shí)生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 分類(lèi)號(hào): C12Q1/68
• 代理公司: 廣州嘉權(quán)專利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44205
• 代理人: 鄭瑩

1.多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，包括熱啟動(dòng)Taq酶系統(tǒng)、通用引物、熒光探針、陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照，其特征在于：所述熒光探針為HPV特異性MGB探針，HPV特異性MGB探針的序列如下：

探針1??TTGGCATAATCAATTATTT

探針2??TGGGGCAATCAGTTRTTTGT

探針3??CTGATTGTTCCARCARATG

探針4??AATCAGTTGTTTGTTACTGT

探針5??TTTRTTACCTGTGTTGATAC

探針6??TAACTGTTGTGGATACCAC

探針7??TATATGTTGGCACAATCAA

探針8??TGGTTACCCCAACAAATG

探針9??TAATTGATTATGCCAGCAAACA

探針10?TTACCTGTGTTGATACYAC

探針11?CTGATTGCCCCAACAAAT

探針12?TATWTGTTGGCATAATCAATTA

探針13?ACAAAYAACTGATTGCCCCA

探針14?ACTACAGTAACAAAYAATTG

探針15?ACAAACAACTGATTATGCCAAC

探針16?CTCATTTGGCTACTGTAAATGCAGACAC

探針17?TTCAGGATACTGCCCCGGACAGTAGG

探針18?CTCCTAAATACATTGCTGGACAAAATAC；

上述探針的3’端連接有MGB，5’端連接有熒光基團(tuán)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述通用引物為：

引物1?GCMCAGGGWCATAAYAATGG

引物2?GCTCAGGGTTTAAACAATGG

引物3?GCCCAGGGCCACAATAATGG

引物4?GCNCAGGGNCACAATAATGG

引物5?GCNCAGGGNCATAACAATGG

引物6?GCNCAGGGNCATAATAATGG

引物7?CGTCCMARRGGAWACTGATC

引物8?TGAAAAATAAACTGTAAATCATATTC

引物9?CCTATTCTTCACCATGCCTTA

引物10?TGGTATTGATATTATGAATGTATGAC；

引物中的N指肌苷。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述試劑盒設(shè)有內(nèi)標(biāo)引物及內(nèi)標(biāo)探針，內(nèi)標(biāo)引物如下：

引物11?CAACTTCATCCACGTTCACC

引物12?GAAGAGCCAAGGACAGGTAC?

內(nèi)標(biāo)探針的序列如下：

探針19?TCTCCCTGCAGAGGGTTAAGGCGC。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述熱啟動(dòng)Taq酶系統(tǒng)中添加有UDG酶。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述試劑盒還設(shè)有DNA提取液，DNA提取液的組成為EDTA的濃度為0.25mol/L、乙酸鈉的濃度為25mmol/L和DTT的濃度為1mmol/L。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述熱啟動(dòng)Taq酶系統(tǒng)含有經(jīng)過(guò)化學(xué)修飾的熱啟動(dòng)Taq酶、dNTPs和UDG酶，其中每人份體系中熱啟動(dòng)Taq酶為5U，dNTPs為0.2mmol/L，UDG酶為0.3U。

7.根據(jù)權(quán)利要求1、2或6所述的多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒為三色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，其探針16～18連接的熒光基團(tuán)不同于探針1～15連接的熒光基團(tuán)。

8.根據(jù)權(quán)利要求1、2或6所述的多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，其特征在于：所述多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒為四色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，其探針1～2連接的熒光基團(tuán)不同于探針3～18連接的熒光基團(tuán)。

9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的多色高危HPV熒光檢測(cè)試劑盒，其特征在于：內(nèi)標(biāo)探針連接的熒光基團(tuán)不同于探針1～18連接的熒光基團(tuán)。