[發明專利]一種選擇性生產槐糖脂的方法

在審

• 申請號: 201410428837.6
• 申請日: 2014-08-27
• 公開（公告）號: CN104178538A
• 公開（公告）日: 2014-12-03
• 發明（設計）人: 陳靜;張紅蕊
• 申請（專利權）人: 齊魯工業大學
• 主分類號: C12P19/12
• 分類號: C12P19/12;C12R1/645
• 代理公司: 濟南金迪知識產權代理有限公司 37219
• 代理人: 楊磊;李寶成

1.一種選擇性生產槐糖脂的方法，步驟如下：

(1)取擬威克酵母(Wickerhamiella?domercqiae?Y_2A?CGMCC?NO.3798)接種于培養基上，28～32℃活化培養24～48小時，得活化的擬威克酵母；

(2)將步驟(1)制得的活化的擬威克酵母接種于種子培養基中，28～32℃、100～200r/min培養20～28h，得擬威克酵母種子液；

(3)按照體積比4～6％的接種量，將步驟(2)制得的擬威克酵母種子液接種到發酵培養基中，28～32℃、160r/min培養144～168小時，得發酵液，發酵液經分離、純化，即得槐糖脂；

當所述的發酵培養基為發酵培養基A時，得內酯型槐糖脂；發酵培養基A的組分如下：葡萄糖75～85g/L，油酸60～80mL/L，硫酸銨3～5g/L，KH₂PO₄0.8～1.2g/L，Na₂HPO₄·12H₂O0.8～1.2g/L，酵母粉1.5～3.5g/L，MgSO₄·7H₂O0.4～0.6g/L，pH5.5～6.5，水定容；

當所述的發酵培養基為發酵培養基B時，得酸型槐糖脂；發酵培養基B的組分如下：葡萄糖75～85g/L，油酸60～80mL/L，硫酸銨3～5g/L，KH₂PO₄0.8～1.2g/L，Na₂HPO₄·12H₂O0.8～1.2g/L，酵母粉1.5～3.5g/L，FeSO₄·7H₂O0.04～0.06g/L，pH5.5～6.5，水定容。

2.根據權利要求1所述的選擇性生產槐糖脂的方法，其特征在于，步驟(1)中所述的培養基為斜面培養基，組分如下：葡萄糖18～22g/L，酵母粉8～12g/L，蛋白胨18～22g/L，瓊脂粉18～22g/L，蒸餾水定容。

3.根據權利要求1所述的選擇性生產槐糖脂的方法，其特征在于，步驟(2)中所述的種子培養基組分如下：葡萄糖18～22g/L，酵母粉8～12g/L，蛋白胨18～22g/L，蒸餾水定容。

4.根據權利要求1所述的選擇性生產槐糖脂的方法，其特征在于，步驟(3)中當所述的發酵培養基為發酵培養基A時，所述分離純化步驟為：5000r/min轉速離心分離10分鐘，沉淀，向沉淀中加入0.5倍發酵液體積的乙酸乙酯萃取，萃取液40℃減壓干燥。

5.根據權利要求1所述的選擇性生產槐糖脂的方法，其特征在于，步驟(3)中當所述的發酵培養基為發酵培養基B時，所述分離純化步驟為：5000r/min轉速離心分離10分鐘，棄沉淀，向上清液中加入0.5倍發酵液體積的乙醇萃取，萃取液40℃減壓干燥。

6.根據權利要求1所述的選擇性生產槐糖脂的方法，其特征在于，步驟(3)中發酵培養基A的組分如下：

葡萄糖80g/L，油酸60mL/L，硫酸銨5g/L，KH₂PO₄1g/L，Na₂HPO₄·12H₂O1g/L，酵母粉3g/L，MgSO₄·7H₂O0.5g/L，pH6，水定容。

7.根據權利要求1所述的選擇性生產槐糖脂的方法，其特征在于，步驟(3)中發酵培養基B的組分如下：

葡萄糖80g/L，油酸60mL/L，硫酸銨5g/L，KH₂PO₄1g/L，Na₂HPO₄·12H₂O1g/L，酵母粉3g/L，FeSO₄·7H₂O0.05g/L，pH6，水定容。