[發(fā)明專(zhuān)利]耐氧梭菌及其在去氧甲基安哥拉紫檀素有氧合成中的應(yīng)用有效
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 201410426881.3 | 申請(qǐng)日: | 2014-08-27 |
| 公開(kāi)(公告)號(hào): | CN104371950B | 公開(kāi)(公告)日: | 2017-02-15 |
| 發(fā)明(設(shè)計(jì))人: | 王秀伶;李夢(mèng);彭文濤;李慧 | 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人: | 河北農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類(lèi)號(hào): | C12N1/20 | 分類(lèi)號(hào): | C12N1/20;C12P7/22;C12R1/145 |
| 代理公司: | 石家莊國(guó)為知識(shí)產(chǎn)權(quán)事務(wù)所13120 | 代理人: | 夏素霞 |
| 地址: | 071001 *** | 國(guó)省代碼: | 河北;13 |
| 權(quán)利要求書(shū): | 查看更多 | 說(shuō)明書(shū): | 查看更多 |
| 摘要: | |||
| 搜索關(guān)鍵詞: | 耐氧梭菌 及其 甲基 安哥拉 紫檀 素有 合成 中的 應(yīng)用 | ||
1.一種耐氧梭菌(Clostridium?sp.)Aeroto-AUH-JLC108,保藏號(hào)為CGMCC?No.9550。
2.權(quán)利要求1所述的耐氧梭菌Aeroto-AUH-JLC108在去氧甲基安哥拉紫檀素有氧合成中的應(yīng)用。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的耐氧梭菌Aeroto-AUH-JLC108在去氧甲基安哥拉紫檀素有氧合成中的應(yīng)用,其特征在于包括以下步驟:
(1)耐氧菌株Aeroto-AUH-JLC108的培養(yǎng)
將低溫冷凍保存的耐氧梭菌Aeroto-AUH-JLC108融化并按10~15%接種量接種到盛有新鮮BHI液體培養(yǎng)基的試管中,37℃下培養(yǎng)24小時(shí);再以10%接種量將試管中的耐氧菌株Aeroto-AUH-JLC108重新轉(zhuǎn)接到盛有新鮮BHI液體培養(yǎng)基中,培養(yǎng)12~18小時(shí)作為種子液;
底物黃豆苷原與耐氧菌株Aeroto-AUH-JLC108共培養(yǎng)
將耐氧菌株Aeroto-AUH-JLC108的種子液轉(zhuǎn)接到BHI液體培養(yǎng)基中,同時(shí)加入黃豆苷原進(jìn)行共培養(yǎng);
(3)代謝產(chǎn)物的分離純化。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的耐氧梭菌Aeroto-AUH-JLC108在去氧甲基安哥拉紫檀素有氧合成中的應(yīng)用,其特征在于所述步驟(2)中種子液按10~15%的量接種,加入黃豆苷原母液使黃豆苷原的終濃度為1.6~2.0毫摩爾/升,37℃恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)2~3天。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的耐氧梭菌Aeroto-AUH-JLC108在去氧甲基安哥拉紫檀素有氧合成中的應(yīng)用,其特征在于黃豆苷原母液濃度為40~60毫摩爾/升。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的耐氧梭菌Aeroto-AUH-JLC108在去氧甲基安哥拉紫檀素有氧合成中的應(yīng)用,其特征在于所述步驟(3)中分離純化方法為:用等體積的乙酸乙酯將培養(yǎng)物萃取2次,萃取液過(guò)濾后蒸干,加入100%甲醇溶液,用制備柱在HPLC上進(jìn)行分離得到代謝產(chǎn)物去氧甲基安哥拉紫檀素。
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