[發(fā)明專利]一種早熟梨莖段的組織培養(yǎng)方法及培養(yǎng)基有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410420032.7 | 申請日： | 2014-08-22 |
| 公開（公告）號： | CN104126511A | 公開（公告）日： | 2014-11-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 王宏;藺經(jīng);常有宏;馬娜;甘慧芳 | 申請（專利權(quán)）人： | 江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 南京匯盛專利商標(biāo)事務(wù)所(普通合伙) 32238 | 代理人： | 袁靜 |
| 地址： | 210014 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 早熟 梨莖段 組織培養(yǎng) 方法 培養(yǎng)基 | ||
1.一種早熟梨莖段的組織培養(yǎng)方法，其特征在于包括如下步驟：將外植體采用初始接種培養(yǎng)基進(jìn)行誘導(dǎo)分化培養(yǎng)，得到初代組培苗；將所述初代組培苗用增殖培養(yǎng)基進(jìn)行增殖培養(yǎng)，然后切取新稍轉(zhuǎn)接入壯苗培養(yǎng)基進(jìn)行繼代培養(yǎng)，再依次轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)基A和生根培養(yǎng)基B進(jìn)行生根培養(yǎng)；
所述初始接種培養(yǎng)基是在1/2MS或AS基本培養(yǎng)基中添加6-BA、NAA和GA3后得到的培養(yǎng)基，所述6-BA的終濃度為0.5-1.0mg/L，所述NAA的終濃度為0.05-0.5mg/L，所述GA3的終濃度為0.2-3mg/L，所述初始接種培養(yǎng)基的pH為5.5-5.8；
所述增殖培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基中添加6-BA、NAA后得到的培養(yǎng)基，所述6-BA的終濃度為0.5~1.0mg/L，所述NAA的終濃度為0.1~0.2mg/L，所述增殖培養(yǎng)基的pH為5.5-5.8；
所述壯苗培養(yǎng)基是1/3MS培養(yǎng)基或1/4QL培養(yǎng)基，所述壯苗培養(yǎng)基的pH為5.5-5.8；
所述生根培養(yǎng)基A是在1/4QL培養(yǎng)基中添加IAA、6-BA和NAA后得到的培養(yǎng)基，所述IAA的終濃度為0.4-0.6mg/L，所述6-BA的終濃度為0.8-1.2mg/L，所述NAA的終濃度為0.05-0.15mg/L,所述的生根培養(yǎng)基的pH為5.5-5.8；
所述生根培養(yǎng)基B是1/4QL培養(yǎng)基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述早熟梨莖段的組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述初始接種培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基、壯苗培養(yǎng)基、生根培養(yǎng)基A和生根培養(yǎng)基B中均添加有蔗糖和瓊脂，所述蔗糖的終濃度為20~30g/L，所述瓊脂的終濃度為5-7g/L；優(yōu)選的技術(shù)方案中，所述增殖培養(yǎng)基中添加有終濃度為0.5-3mg/L的GA3。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述早熟梨莖段的組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述初始接種培養(yǎng)基中的培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度22~25℃，每天光照15-16小時、黑暗8-9小時，光照強度為1500-2000lx，每25-32天更換一次初始接種培養(yǎng)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述早熟梨莖段的組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述增殖培養(yǎng)基中的培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度22~25℃，每天光照15-17小時、黑暗7-9小時，光照強度為1500-2000lx，培養(yǎng)時間為25-32天。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述早熟梨莖段的組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述壯苗培養(yǎng)基中的培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度22~25℃，每天光照15-17小時、黑暗7-9小時，光照強度為1500-2000lx，每13-16天繼代一次，繼代次數(shù)為2-3次。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述早熟梨莖段的組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述生根培養(yǎng)基A中的培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度24~26℃，黑暗培養(yǎng)7-12天。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述早熟梨莖段的組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述生根培養(yǎng)基B中的培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度22~25℃，每天光照15-16小時、黑暗8-9小時，光照強度為1500-2000lx，培養(yǎng)時間為50-60天。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述早熟梨莖段的組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述外植體為成齡母株莖段；優(yōu)選為當(dāng)年生帶芽莖段。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述早熟梨莖段的組織培養(yǎng)方法，其特征在于所述外植體在誘導(dǎo)分化培養(yǎng)前進(jìn)行如下處理：用羧芐青霉素水溶液浸泡所述外植體，然后采用含有愛力克TMA、B和吐溫20的溶液對所述外植體進(jìn)行消毒。
10.用于早熟梨莖段組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基，由如下培養(yǎng)基中的全部或部分組成：
（a）初始接種培養(yǎng)基；
所述初始接種培養(yǎng)基是在1/2MS或AS基本培養(yǎng)基中添加6-BA、NAA和GA3后得到的培養(yǎng)基，所述6-BA的終濃度為0.5-1.0mg/L，所述NAA的終濃度為0.05-0.5mg/L，所述GA3的終濃度為0.2-3mg/L，所述初始接種培養(yǎng)基的pH為5.5-5.8；
（b）增殖培養(yǎng)基；
所述增殖培養(yǎng)基是在MS培養(yǎng)基中添加6-BA、NAA后得到的培養(yǎng)基，所述6-BA的終濃度為0.5~1.0?mg/L，所述NAA的終濃度為0.1~0.2?mg/L，所述增殖培養(yǎng)基的pH為5.5-5.8；優(yōu)選的技術(shù)方案中，所述增殖培養(yǎng)基中添加有終濃度為0.5-3mg/L的GA3；
（c）壯苗培養(yǎng)基；
所述壯苗培養(yǎng)基是1/3MS培養(yǎng)基或1/4QL培養(yǎng)基，所述壯苗培養(yǎng)基的pH為5.5-5.8；
（d）生根培養(yǎng)基；
所述生根培養(yǎng)基包括生根培養(yǎng)基A和生根培養(yǎng)基B；
所述生根培養(yǎng)基A是在1/4QL培養(yǎng)基中添加IAA、6-BA和NAA后得到的培養(yǎng)基，所述IAA的終濃度為0.4-0.6mg/L，所述6-BA的終濃度為0.8-1.2mg/L，所述NAA的終濃度為0.05-0.15mg/L；
所述生根培養(yǎng)基B是1/4QL培養(yǎng)基。
該專利技術(shù)資料僅供研究查看技術(shù)是否侵權(quán)等信息，商用須獲得專利權(quán)人授權(quán)。該專利全部權(quán)利屬于江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院，未經(jīng)江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院許可，擅自商用是侵權(quán)行為。如果您想購買此專利、獲得商業(yè)授權(quán)和技術(shù)合作，請聯(lián)系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201410420032.7/1.html，轉(zhuǎn)載請聲明來源鉆瓜專利網(wǎng)。
