[發明專利]一種油基鉆屑降解菌及其制備和應用方法

有效

• 申請號: 201410419910.3
• 申請日: 2014-08-22
• 公開（公告）號: CN104312936B
• 公開（公告）日: 2020-06-16
• 發明（設計）人: 單海霞;何煥杰;王中華;馬金;王芹;詹適新
• 申請（專利權）人: 中國石油化工集團公司;中石化中原石油工程有限公司鉆井工程技術研究院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;B09C1/10;A62D3/02;C12R1/385;C12R1/01
• 代理公司: 鄭州睿信知識產權代理有限公司 41119
• 代理人: 牛愛周

本發明公開一種油基鉆屑降解菌及其制備和應用方法，屬含油固體廢棄物微生物處理技術領域。油基鉆屑降解菌由復合菌群構建組成，通過對石油污染土壤中的細菌進行富集、分離、純化和篩選，純化出了3株降解單菌，然后通過發酵培養制備，該油基鉆屑降解菌含有拉丁文學名為Pseudomonas Aeruginosa的銅綠假單胞菌、拉丁文學名為Kocuria kristinae的克氏微球菌和拉丁文學名為Acinetobacter Calcoaceticus的乙酸鈣不動桿菌，用于油基鉆屑中的石油組分降解，具有除油效率高、處理周期短的顯著優勢。對于初始油含量小于5%的油基鉆屑，在處理5～30d，油含量可降至1%以下，油去除率達80%以上。用于含油土壤、含油污泥的生物修復，也具有良好的應用前景。

技術領域

本發明涉及一種油基鉆屑降解菌及其制備和應用方法，屬含油固體廢棄物微生物處理技術領域。

背景技術

含油固體廢棄物中的油基鉆屑已被列入國家危險廢物，因其具有體系異常穩定，污染物種類復雜、含油量高等特點，處理難度非常大。在油基鉆屑處理技術中，生物處理技術因具有安全、經濟、高效、無二次污染等優點，已成為現場油基鉆屑安全處理和處置的重要手段，特別是對機械裝置無法清除的孔隙油和薄油層，同時又限制使用化學藥劑時，運用生物處理技術可顯出更大的優越性。現有的油基鉆屑微生物處理方法是采用的厭氧堆腐-好氧降解-植物種植工藝，處理周期一般在180d，甚至360d以上，總石油烴(THP)含量可降至1％以下，存在著短期內降解率不高，處理周期長的缺陷。

發明內容

本發明目的是克服生物降解菌短期內降解率不高、處理周期長的缺陷，提供一種油基鉆屑降解菌。

本發明另一個目的是提供一種油基鉆屑降解菌的制備方法。

本發明目的還包括提供上述油基鉆屑降解菌的應用。

一種油基鉆屑降解菌，由復合菌群構建組成，含有拉丁文學名為PseudomonasAeruginosa的銅綠假單胞菌、拉丁文學名為Kocuria kristinae的克氏微球菌和拉丁文學名為Acinetobacter Calcoaceticus的乙酸鈣不動桿菌。

一種油基鉆屑降解菌的制備方法，包括如下步驟：

1、在井場取石油污染土壤，對土壤中的細菌在LB培養基、中性環境、溫度為30℃～40℃條件下進行富集培養，將富集培養后的細菌經分離、純化和篩選，獲得以下3株降解單菌：

銅綠假單胞菌，拉丁文學名Pseudomonas Aeruginosa；

克氏微球菌，拉丁文學名Kocuria kristinae；

乙酸鈣不動桿菌，拉丁文學名Acinetobacter Calcoaceticus。

2、將步驟1所得3株降解單菌按照銅綠假單胞菌：克氏微球菌：乙酸鈣不動桿菌1：(0.9～1.1)：(0.9～1.1)的體積比例進行混合，得到混合菌液。

3、將步驟2的混合菌液在工業培養基中進行發酵培養，發酵液經過濾、分離、干燥后，得到油基鉆屑降解菌，命名為BSG。

所述的步驟3中的工業培養基，按質量/體積比計，由1％～2％的蛋白胨、0.8％～1.2％的葡萄糖、1.5％～2％的酵母膏、0.1％～0.15％的氯化鈉、0.5％～0.7％的磷酸氫二鉀、1％～2％的氯化鎂、水組成。

所述的步驟3中的發酵培養的條件為：發酵溫度33～37℃，接種量10％～20％v/v，攪拌速度100～150rpm，發酵時間24～48h，發酵過程中向培養基中通入空氣，每分鐘通入空氣的氣液體積比為1～1.5。

所述的步驟3中油基鉆屑降解菌BSG的菌活數均為10⁹～10¹¹個/g。