[發明專利]用于解淀粉乳桿菌L6高密度培養的培養基及其培育方法

有效

• 申請號: 201410419744.7
• 申請日: 2014-08-22
• 公開（公告）號: CN104212743B
• 公開（公告）日: 2017-03-01
• 發明（設計）人: 李理;劉力
• 申請（專利權）人: 華南理工大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/225
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司44245
• 代理人: 蔡茂略,羅觀祥

技術領域

本發明涉及微生物的培養，特別涉及解淀粉乳桿菌L6的高密度培養的培養基及培養技術。屬于微生物培養技術領域。

背景技術

黃漿水為豆腐制作過程中產生的黃色瀝水，含有大量水溶性的糖類如水蘇糖、棉籽糖等低聚糖，以及異黃酮、蛋白質和維生素等營養物質，非常適合微生物的生長。直接排放不僅會造成資源的浪費，而且會嚴重污染環境與土壤，因此實現對黃漿水的綜合利用引起了國內外科學工作者的關注。

近年來研究發現，豆制品加工過程中產生的黃漿水，在存貯的過程中經自然發酵所生成的酸漿水，是一種良好的豆腐凝固劑，已在部分豆制品生產廠家使用，以酸漿水制成的豆腐色澤微黃、口感鮮嫩，無化學點漿劑的苦澀味，屬純天然食品。但目前使用的酸漿水均為自然發酵，所涉及到的微生物除產酸的乳酸菌外，還含有部分其它的細菌和酵母等，其中也有可能污染蠟樣芽孢桿菌、葡萄球菌等雜菌，對豆腐及其制品的食用安全性構成危害。

本實驗室從自然發酵的豆腐酸漿中分離得到一株乳酸菌Lactobacillus?amylolyticus?L6，取得了以下良好結果：

(1)將Lactobacillus?amylolyticus?L6種子液接入到滅菌的黃漿水中，進行純種發酵，獲得了一種新型的豆腐點漿劑，解決了自然發酵酸漿水中微生物生長雜亂的問題，提高了酸漿豆腐的質量安全性。

(2)該菌株可以直接利用黃漿水中的低聚糖和淀粉等生長產酸，無需補充其它碳源和營養素即可達到點漿劑所需酸度，降低了生產成本。

高密度培養技術，也就是高密度發酵技術。一般來說，高密度培養是指應用一定的培養技術或裝置提高菌體的發酵密度，使菌體密度較傳統培養方式有顯著的提高，從而達到減少培養體積，縮短生產周期，最終提高特定產物的比生產速率，減少設備投資從而降低生產成本，提高在市場上的競爭力。

隨著發酵劑的商業化生產和應用的迅速增加，工業發酵的基本目標自然轉向了以最小的代價獲得最大的產值和利潤。而實現這一目標的工程手段是建立相應的高效發酵模式。

解淀粉乳桿菌Lactobacillus?amylolyticus?L6通過使用MRS液體培養基制備種子發酵液時活菌數不高，另外市售MRS培養基價格較高限制了其在工業生產中的應用。

發明內容

本發明的目的在于提供一種原料廉價，解淀粉乳桿菌L6(Lactobacillus?amylolyticus?L6)的高密度培養基制備的濃縮型發酵劑含有的活菌數高達4.5×10⁹cfu/ml的用于解淀粉乳桿菌L6高密度培養的培養基及其培育方法。

本發明中解淀粉乳桿菌L6(Lactobacillus?amylolyticus?L6)為本發明人從自然發酵的豆腐酸漿水中提取并分離鑒定的菌種。菌種(株)L6保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址在北京市朝陽區北辰西路1號院中科院微生物研究所，其菌種保藏編號為：CGMCCNo.9090，保藏日期為2014年4月25日，菌種的分類命名為解淀粉乳桿菌(Lactobacillus?amylolyticus)，保藏證明參見在申請人申請的申請號為201410277246.3的發明專利申請。

本發明使用豆腐黃漿水作為解淀粉乳桿菌L6(Lactobacillus?amylolyticus?L6)的基礎培養基，并對其培養條件進行了研究，旨在提高培養物中解淀粉乳桿菌L6(Lactobacillus?amylolyticus?L6)的活菌密度，制備廉價的乳酸菌濃縮發酵劑，為進一步利用其制備直投式發酵劑奠定基礎。在利用解淀粉乳桿菌L6(Lactobacillus?amylolyticus?L6)發酵黃漿水，進行工業化生產制備豆腐凝固劑時，乳酸菌濃縮發酵劑的制備就顯得尤為重要。乳酸菌濃縮發酵劑制備的關鍵是要實現對其進行高活性、高密度的培養以及價格低廉。

本發明目的通過如下技術方案實現：

一種用于解淀粉乳桿菌L6的高密度培養的培養基，由基礎培養基和營養成分組成，所述基礎培養基由豆腐黃漿水經離心去除不溶物形成；以質量份數計，所述營養成分由4-12份蛋白胨、5-20份酵母提取物和7.5-40份玉米淀粉組成；每1升基礎培養基加入4-12g蛋白胨，5-20g酵母提取物和7.5-40g玉米淀粉。

優選地，所述營養成分加入基礎培養基后還包括滅菌，所述滅菌的溫度為120℃-122℃，所述滅菌的時間為15min-20min。

所述每1升基礎培養基加入8.2g蛋白胨、10.7g酵母提取粉和22g玉米淀粉。