[發明專利]用于檢測肝癌與肝硬化相關多肽-蛋白組合式標志物的雙抗體夾心試劑盒有效
| 申請號： | 201410419575.7 | 申請日： | 2014-08-22 |
| 公開（公告）號： | CN104316695A | 公開（公告）日： | 2015-01-28 |
| 發明（設計）人： | 魏開華;鄭俊杰;侯利平;孫云波;宋純艷;楊保安;周婷婷;甄蓓;劉曙晨 | 申請（專利權）人： | 北京蛋白質組研究中心;中國人民解放軍軍事醫學科學院放射與輻射醫學研究所 |
| 主分類號： | G01N33/68 | 分類號： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京集佳知識產權代理有限公司 11227 | 代理人： | 趙青朵 |
| 地址： | 102206 *** | 國省代碼： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 用于 檢測 肝癌 肝硬化 相關 多肽 蛋白 組合式 標志 抗體 夾心 試劑盒 | ||
1.一種檢測肝癌或肝硬化相關“多肽-蛋白組合式標志物”的雙抗體夾心酶聯免疫吸附法或化學發光法試劑盒，其特征在于，包括捕獲抗體和檢測抗體，所述捕獲抗體與蛋白HKa特異性結合；所述檢測抗體與多肽HKP15、多肽HKP09或蛋白HKa均特異性結合；?
所述多肽HKP09的全長氨基酸序列如SEQ?ID?No.1所示；?
所述多肽HKP15的全長氨基酸序列如SEQ?ID?No.2所示；?
所述蛋白HKa的全長氨基酸序列如SEQ?ID?No.3所示。?
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述捕獲抗體為單克隆抗體或多克隆抗體；所述檢測抗體為單克隆抗體或多克隆抗體。?
3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述捕獲抗體由保藏編號為CGMCC?No.9332的單克隆細胞株2G6分泌；所述檢測抗體由保藏編號為CGMCC?No.9331的單克隆細胞株3D11分泌。?
4.根據權利要求1～3任一項所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括HKa標準品、碳酸鹽包被緩沖液、PBST洗滌緩沖液、卵清蛋白封閉劑、底物液、硫酸終止液和96孔酶標板。?
5.如權利要求1～4任一項所述的試劑盒在制備肝癌或肝硬化檢測產品中的應用。?
6.權利要求1～4任一項所述的試劑盒的使用方法，其特征在于，包括以下步驟：?
步驟1：以捕獲抗體捕獲待測樣品中的組合式標志物中的蛋白HKa；?
步驟2：以檢測抗體檢測上述已捕獲的蛋白HKa的表位多肽HKP09或多肽HKP15；?
步驟3：根據檢測值繪制標準曲線，獲得待測樣品中“多肽-蛋白組合式標志物”的含量。?
7.根據權利要求6所述的使用方法，其特征在于，所述捕獲抗體由保藏編號為CGMCC?No.9332的單克隆細胞株2G6分泌；所述檢測抗體由保藏編號為CGMCC?No.9331的單克隆細胞株3D11分泌。?
8.根據權利要求6或7所述的使用方法，其特征在于，所述試劑盒中的捕獲抗體包被于固相載體；優選的，固相載體為酶標板。?
9.根據權利要求6或7所述的使用方法，其特征在于，所述試劑盒中的檢測抗體上含有標記物質；優選的，標記物質為辣根過氧化物酶HRP。?
10.根據權利要求9所述的使用方法，其特征在于，所述捕獲抗體的包被濃度為1000ng/mL；所述檢測抗體的檢測滴度為1：2000。?
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