[發(fā)明專利]一種用于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的基因診斷試劑盒

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410417499.6
• 申請日: 2014-08-21
• 公開（公告）號: CN105420347A
• 公開（公告）日: 2016-03-23
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 馮學(xué)兵;孫凌云
• 申請（專利權(quán)）人: 南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬鼓樓醫(yī)院
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68
• 代理公司: 南京中新達(dá)專利代理有限公司 32226
• 代理人: 孫鷗;朱杰

1.一種系統(tǒng)性紅斑狼瘡的基因診斷試劑盒，其特征在于，包括有用于擴(kuò)增OASL、IGS15和LY6E這3個基因的引物，還包括看家基因RPLPO的引物，以及擴(kuò)增試劑。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種系統(tǒng)性紅斑狼瘡的基因診斷試劑盒，其特征在于，各基因引物序列分別為：

OASL-F：5’-CCATCACGGTCACCATTGTG-3’

OASL-R：5’-ACCGCAGGCCTTGATCAG-3’

ISG15-F：5’-GGTGGACAAATGCGACGAA-3’

ISG15-R：5’-CAGCCCGCTCACTTGCT-3’

LY6E-F：5’-ACTGCGTGACTGTGTCTGCTA-3’

LY6E-R：5’-AGGCTGTGGCCAAATGTC-3’

RPLPO-F：5’-GTTTCATTGTGGGAGCAGACA-3’

RPLPO-R：5’-CATGGTGTTCTTGCCCATCA-3’。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種系統(tǒng)性紅斑狼瘡的基因診斷試劑盒，其特征在于所述擴(kuò)增試劑包括預(yù)混有PCR緩沖液和dNTPs的熱啟動Taq酶、ROX惰性參比染料和超純水。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種系統(tǒng)性紅斑狼瘡的基因診斷試劑盒，其特征在于，擴(kuò)增試劑由以下體積的組分組成：cDNA1.0μl，PremixExTaqTM(2×)10μl，ROX惰性參比染料(50×)0.4μl，上游引物0.4μl，下游引物0.4μl，超純水7.8μl。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種系統(tǒng)性紅斑狼瘡的基因診斷試劑盒，其特征在于，通過實(shí)時定量PCR技術(shù)檢測LY6E、IGS15、OASL的表達(dá)，取3次檢測值的平均數(shù)計算熒光信號到達(dá)設(shè)定閾值時所經(jīng)歷的循環(huán)數(shù)，減去看家基因RPLPO到達(dá)閾值時的循環(huán)數(shù)值計算出差異值，再通過2^-差異值計算各基因相對表達(dá)值。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種系統(tǒng)性紅斑狼瘡的基因診斷試劑盒，其特征在于，通過計算改良干擾素指數(shù)進(jìn)行結(jié)果判斷，以待測樣品基因相對表達(dá)值-正常組平均基因相對表達(dá)值，再除以正常組基因表達(dá)標(biāo)準(zhǔn)差，計算出單個基因干擾素指數(shù)，將對應(yīng)于LY6E、ISG15和OASL的三個值相加，即為改良干擾素指數(shù)。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種系統(tǒng)性紅斑狼瘡的基因診斷試劑盒，其特征在于，在改良干擾素指數(shù)為2.37時，其診斷的敏感性和特異性達(dá)到最佳界值，分別為70％和80％。