[發(fā)明專利]水中懸浮顆粒物上痕量環(huán)丙沙星萃取富集和定量的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410416934.3
• 申請日: 2014-08-22
• 公開（公告）號: CN104155400A
• 公開（公告）日: 2014-11-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐勇鵬;崔福義
• 申請（專利權(quán)）人: 哈爾濱工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/08
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于環(huán)境監(jiān)測技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種水環(huán)境中環(huán)丙沙星的檢測方法，具體涉及一種水中顆粒物上環(huán)丙沙星萃取富集的定量方法。

背景技術(shù)

環(huán)丙沙星屬于第三代氟喹諾酮抗生素藥物，其抗菌活性是目前廣泛應(yīng)用的氟喹諾酮類中最強(qiáng)的，它對革蘭陰性桿菌有高度抗菌活性，對葡萄球菌屬具有良好抗菌作用，對肺炎球菌、鏈球菌屬的作用略差于葡萄球菌屬，能殺死如炭疽一類的細(xì)菌，通過干擾導(dǎo)致DNA復(fù)制后反轉(zhuǎn)錄的酶，阻止DNA和蛋白質(zhì)的合成。

環(huán)丙沙星在臨床醫(yī)療中使用廣泛，由于在生物體內(nèi)不完全代謝，排泄物中仍會保持較高藥物濃度，常規(guī)水處理及污水處理不能徹底降低其濃度，最終流入水環(huán)境中。近些年，國內(nèi)外水環(huán)境中痕量環(huán)丙沙星的報(bào)道很多，濃度由ng/L到μg/L?的量級，這些水環(huán)境中的環(huán)丙沙星，最終通過取水進(jìn)入到飲用水系統(tǒng)中，有效降解水中環(huán)丙沙星的技術(shù)需要開發(fā)。因此，為了確保飲用水安全，準(zhǔn)確檢測出水環(huán)境中、水處理系統(tǒng)內(nèi)痕量環(huán)丙沙星的方法是必備的前提。目前，國內(nèi)外在萃取富集和定量檢測水中痕量環(huán)丙沙星的技術(shù)上也不斷發(fā)展，常見的報(bào)道有固相萃取協(xié)同高效液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的方法，在進(jìn)行固相萃取之前，所有水樣品需要經(jīng)過0.45?μm的濾膜過濾，溶解態(tài)的環(huán)丙沙星經(jīng)過固相萃取后，富集之后，檢測。這些方法局限在溶解態(tài)環(huán)丙沙星的定量上。有研究報(bào)道，環(huán)丙沙星屬于羧基酸物質(zhì)，很容易吸附在顆粒物表面，因此，顆粒物表面的環(huán)丙沙星很有必要萃取下來，進(jìn)行定量，這樣，可以全方位的掌握水中環(huán)丙沙星的污染現(xiàn)狀，為解析環(huán)丙沙星在水環(huán)境中的遷移規(guī)律，在水處理系統(tǒng)中的衰減規(guī)律，都有重要的支撐作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種水中懸浮顆粒物上痕量環(huán)丙沙星萃取富集和定量的方法。

本發(fā)明的目的是通過以下將數(shù)據(jù)方案實(shí)現(xiàn)的：

（1）取目標(biāo)水樣2000-4000ml，用微孔纖維膜過濾，收集過濾后的濾膜及表面截留的懸浮顆粒物，將濾膜晾干后剪成碎片置于三角瓶中，用量筒量取適量萃取劑倒入三角瓶中；用封口膜密封好后置于振蕩培養(yǎng)箱中，溫度設(shè)定為4-10℃，關(guān)閉光照使其黑暗，轉(zhuǎn)速設(shè)定為100-200次/min，振蕩8-12h后，將三角瓶取出，進(jìn)行超聲波萃取，萃取時間20-35min，得到萃取液。

（2）用有機(jī)濾膜過濾步驟一得到的萃取液，同時將過濾后的萃取液轉(zhuǎn)移至K-D濃縮瓶中。

（3）加入脫水干燥劑到步驟二K-D濃縮瓶中的萃取過濾液，吸干水份后，將K-D濃縮瓶放入旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器進(jìn)行濃縮，濃縮溫度30-45℃，時間為10-20min，濃縮后體積為1-2ml為宜。

（4）將步驟三濃縮后的液體，用氮?dú)獯祾咧馏w積為1ml以下，停止氮?dú)獯祾摺?/p>

（5）將步驟四得到的濃縮液萃取過濾液定容至1mL，將定容后的液體轉(zhuǎn)移到安捷倫專用瓶中。

（6）在步驟五得到的待測液中加入0.5ml的內(nèi)標(biāo)物，然后在超高壓液相色譜串聯(lián)三級質(zhì)譜聯(lián)用儀器中檢測，檢測參數(shù)如下：

液相條件：a)流動相成分：A.0.2vol.%甲酸，B.甲醇；b)?進(jìn)樣量：10μL；c)?流速：0.2?mL/min；d)?柱溫：30℃；e)?運(yùn)行時間：8min；f)?色譜柱：Acquity?UPLC?BEH；g)?梯度：如表1所示。

質(zhì)譜條件：a)?脫溶劑氣溫度：350℃；b)?源溫度：150℃；c）毛細(xì)管電壓：3000V；d)?脫溶劑氣流速：650L/h；e)?錐氣流速：50L/h。設(shè)置定性和定量離子見表2。

（7）?對色譜質(zhì)譜分析圖進(jìn)行分析，即完成檢測。

上述方法中，步驟（1）所述的微孔纖維膜的孔徑為0.45μm。

上述方法中，步驟（1）所述的懸浮顆粒物的質(zhì)量與萃取劑的體積比為1g：15-20ml。

上述方法中，步驟（1）所述的萃取劑為甲醇。

上述方法中，步驟（1）所述的振蕩器為HDL公司的HZQ-F160型振蕩培養(yǎng)箱，轉(zhuǎn)速為100-200次/min；超聲波萃取機(jī)為KQ-100DE型超聲波萃取機(jī)，超聲頻率為23-40kHz。

上述方法中，步驟（2）所述的有機(jī)濾膜的孔徑為0.22μm。

上述方法中，步驟（3）所述的脫水干燥劑為無水硫酸鈉。

上述方法中，步驟（5）所述的定容有機(jī)溶劑為甲醇。

上述方法中，步驟（6）所述的內(nèi)標(biāo)物根據(jù)實(shí)際水體殘留情況選擇，本方法采用沙拉沙星或洛美沙星，結(jié)構(gòu)和環(huán)丙沙星類似，在目標(biāo)水體未檢出的氟喹諾酮類物質(zhì)。內(nèi)標(biāo)物不僅僅局限于這兩種，只要是同類物質(zhì)，其結(jié)構(gòu)相似，且在所檢測的水樣中沒有檢出均可。