[發明專利]一種靶向檢測并抑制癌細胞的熒光探針、制備方法及應用

有效

• 申請號: 201410412644.1
• 申請日: 2014-08-20
• 公開（公告）號: CN104262373A
• 公開（公告）日: 2015-01-07
• 發明（設計）人: 董宇平;陳笛笛;馮霄;佟斌;石建兵;顧尚志
• 申請（專利權）人: 北京理工大學
• 主分類號: C07F5/02
• 分類號: C07F5/02;C09K11/06;G01N21/64;A61P35/00
• 代理公司: 北京理工大學專利中心 11120
• 代理人: 楊志兵;李愛英

1.一種用于靶向檢測并抑制癌細胞的熒光探針，其特征在于：所述熒光探針為含有4,4',4″-雙氟硼二吡咯基團的1,4-四芳基丁二烯衍生物，其結構式如下：

其中，R為-CHO、-COOCH₃、-NH₃、-CN、氨基酸、短肽和多肽中的一種；R′和R相同。

2.一種如權利要求1所述的用于靶向檢測并抑制癌細胞的熒光探針的制備方法，其特征在于：當R為-CHO、-COOCH₃、-NH₃或-CN時，所述方法步驟如下：

(1)將催化劑加入反應器1中，依次加入良溶劑1和反應物1，在攪拌下進行偶聯反應，反應11h后，過濾，取濾液旋干，得到反應粗產物1；將反應粗產物1溶解于三氯甲烷，以石油醚與二氯甲烷為洗脫劑，利用柱色譜分離提純，干燥，得到固體a；

(2)將4-甲酰基苯硼酸頻哪醇酯加入反應器2中，加入二氯甲烷，得到濃度為5.73g/L的4-甲酰基苯硼酸頻哪醇酯溶液，向所述溶液中通入保護氣體，加入1,4-二甲基吡咯，在攪拌下逐滴加入三氟乙酸，反應12h，加入2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌，反應4h，加入N,N-二異丙基乙胺，待N,N-二異丙基乙胺完全溶解后，將反應器2放入冰浴中，加入三氟化硼乙醚，反應12h，洗滌，分液，取有機相并向有機相中加入無水硫酸鈉，過濾，取濾液旋干，得到反應粗產物2；將反應粗產物2溶解于二氯甲烷，以石油醚與二氯甲烷為洗脫劑，利用柱色譜分離提純，干燥，得到固體b；

(3)將固體a、固體b、碳酸鉀和四(三苯基膦)合鈀加入反應器3中，抽真空，通入保護氣體，加入良溶劑2，在70℃下反應12h，抽濾，取濾液旋干，得到反應粗產物3，將反應粗產物3溶解于三氯甲烷，以石油醚與二氯甲烷為洗脫劑，用柱色譜分離提純，干燥，得到所述熒光探針。

3.根據權利要求2所述的一種用于靶向檢測并抑制癌細胞的熒光探針的制備方法，其特征在于：步驟(1)所述催化劑為氯化鈀和溴化銅的混合物，氯化鈀與溴化銅的物質的量之比為0.04:3；

良溶劑1為乙腈和甲苯的混合溶劑，乙腈與甲苯的體積比為1:50；

反應物1為4-乙炔基苯甲醛、4-乙炔基苯甲酸甲酯、4-乙炔基苯甲腈和4-乙炔基苯胺中的一種；

反應物1、催化劑與良溶劑1的質量比為1:5:28；

石油醚與二氯甲烷的質量比為1:1。

4.根據權利要求2所述的一種用于靶向檢測并抑制癌細胞的熒光探針的制備方法，其特征在于：步驟(2)所述4-甲酰基苯硼酸頻哪醇酯、1,4-二甲基吡咯、三氟乙酸、2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌、N,N-二異丙基乙胺與三氟化硼乙醚的質量比為1:1:0.25:1:6.5:9.8；石油醚與二氯甲烷的質量比為1:4；保護氣體為N₂和Ar中的一種。

5.根據權利要求2所述的一種用于靶向檢測并抑制癌細胞的熒光探針的制備方法，其特征在于：步驟(3)所述保護氣體為N₂和Ar中的一種；

良溶劑2為甲苯和甲醇的混合溶劑，甲苯與甲醇的體積比為3:1；

固體a、固體b、碳酸鉀、四(三苯基膦)合鈀、良溶劑2的質量比為1:2.5:2:0.18:210；石油醚與二氯甲烷的質量比為1:1。