[發明專利]單壁碳納米角?鉑鈀納米粒和巨細胞病毒pp65抗體修飾電極及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201410411398.8
• 申請日: 2014-08-20
• 公開（公告）號: CN104132984B
• 公開（公告）日: 2017-03-08
• 發明（設計）人: 黃微微;蒲曉允;張立群;蔣棟能;劉飛
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第三軍醫大學第二附屬醫院
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/48
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司11275
• 代理人: 趙榮之

1.單壁碳納米角-鉑鈀納米粒和巨細胞病毒pp65抗體修飾電極，其特征在于：所述電極是由全氟磺酸-聚四氟乙烯共聚物膜分散的單壁碳納米角處理后吸附硫堇，然后結合單壁碳納米角-鉑鈀納米粒，再用巨細胞病毒pp65抗體孵育、辣根過氧化物酶封閉非特異結合位點即可。

2.根據權利要求1所述單壁碳納米角-鉑鈀納米粒和巨細胞病毒pp65抗體修飾電極，其特征在于，所述全氟磺酸-聚四氟乙烯共聚物膜分散的單壁碳納米角由以下方法制備：將單壁碳納米角加入全氟磺酸-聚四氟乙烯共聚物膜中，超聲攪拌過夜制得。

3.根據權利要求1所述單壁碳納米角-鉑鈀納米粒和巨細胞病毒pp65抗體修飾電極，其特征在于，所述單壁碳納米角-鉑鈀納米粒由以下方法制備：向殼聚糖溶液中加入單壁碳納米角，超聲分散后離心，沉淀物用雙蒸水洗滌后分散于雙蒸水中，再向其中加入H₂PtCl₆和K₂PdCl₄，攪拌，然后滴加NaBH₄，超聲、離心、洗滌沉淀，將沉淀用雙蒸水分散即可。

4.權利要求1-3任意項所述單壁碳納米角-鉑鈀納米粒和巨細胞病毒pp65抗體修飾電極的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

a.將玻碳電極表面打磨，拋光，干燥，得預處理的電極；

b.將步驟a所得預處理的電極用全氟磺酸-聚四氟乙烯共聚物膜分散的單壁碳納米角修飾，23～26℃干燥，得全氟磺酸-聚四氟乙烯共聚物膜分散的單壁碳納米角修飾的電極；所述全氟磺酸-聚四氟乙烯共聚物膜分散的單壁碳納米角由單壁碳納米角加入全氟磺酸-聚四氟乙烯共聚物膜中，超聲攪拌過夜制得；

c.將b步驟所得全氟磺酸-聚四氟乙烯共聚物膜分散的單壁碳納米角修飾的電極上吸附硫堇，然后雙蒸水清洗；

d.將步驟c所得電極上吸附單壁碳納米角-鉑鈀納米粒，然后用雙蒸水清洗，得單壁碳納米角-鉑鈀納米粒修飾的電極；所述單壁碳納米角-鉑鈀納米粒由如下方法制備：向殼聚糖溶液中加入單壁碳納米角，超聲分散后離心，沉淀物用雙蒸水洗滌后分散于雙蒸水中，再向其中加入H₂PtCl₆和K₂PdCl₄，攪拌，然后滴加NaBH₄，超聲、離心、洗滌沉淀，將沉淀用雙蒸水分散即可；

e.將步驟d所得單壁碳納米角-鉑鈀納米粒修飾的電極上孵育巨細胞病毒pp65抗體；然后用辣根過氧化物酶封閉非特異性位點，制得單壁碳納米角-鉑鈀納米粒和巨細胞病毒pp65抗體修飾電極。

5.含有權利要求1-3任意項所述單壁碳納米角-鉑鈀納米粒和巨細胞病毒pp65抗體修飾電極的電化學生物傳感器。

6.根據權利要求5所述的電化學生物傳感器，其特征在于：包括工作電極、對電極、參比電極和測試底液；所述工作電極為所述單壁碳納米角-鉑鈀納米粒和巨細胞病毒pp65抗體修飾電極，所述對電極為鉑電極，所述參比電極為飽和甘汞電極；所述測試底液為含有0.1mol/LKCl、pH為5.5的濃度為0.1mol/L醋酸-醋酸鈉溶液。

7.利用權利要求5或6所述電化學生物傳感器檢測巨細胞病毒抗原的方法，其特征在于，包括如下步驟：將單壁碳納米角-鉑鈀納米粒和巨細胞病毒pp65抗體修飾電極與樣品溶液共孵育；然后以單壁碳納米角-鉑鈀納米粒和巨細胞病毒pp65抗體修飾電極為工作電極、鉑電極為對電極，飽和甘汞電極為參比電極，含有0.1mol/L?KCl、pH為5.5的濃度為0.1mol/L醋酸-醋酸鈉溶液為測試底液構建電化學生物傳感器，采用差分脈沖伏安法進行掃描測定，電位掃描范圍為-0.5V-0.0V，根據電位-0.252V處峰電流和巨細胞病毒抗原標準曲線計算樣品中巨細胞病毒抗原的濃度。