[發明專利]一種百合的根尖脫毒與快繁方法有效
| 申請號: | 201410409288.8 | 申請日: | 2014-08-19 |
| 公開(公告)號: | CN104186319A | 公開(公告)日: | 2014-12-10 |
| 發明(設計)人: | 陳敏敏;顧俊杰;周音;張建軍;沈強;張平;張宏偉;王暉 | 申請(專利權)人: | 上海市農業科學院;上海鮮花港企業發展有限公司 |
| 主分類號: | A01H4/00 | 分類號: | A01H4/00 |
| 代理公司: | 上海碩力知識產權代理事務所 31251 | 代理人: | 郭桂峰 |
| 地址: | 201106 *** | 國省代碼: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 百合 根尖 脫毒 方法 | ||
1.一種百合的根尖脫毒與快繁方法,包括以下步驟:
步驟1,采用百合根尖作為外植體,將該外植體接種在根尖伸長培養基上培養,使得外植體根尖拉長;
步驟2,將前述根尖拉長的外植體接種在體胚誘導培養基上培養,誘導所述拉長的根尖產生胚性愈傷組織,達到脫毒和再生的目的。
2.如權利要求1所述的一種百合的根尖脫毒與快繁方法,其特征在于,所述步驟1之前還包括百合根尖外植體的獲得:將百合無菌苗接種到生根培養基上,待根長至1-2cm時,將根前端0.3-0.5mm的根尖切下作為外植體。
3.如權利要求2所述的一種百合的根尖脫毒與快繁方法,其特征在于,所述生根培養基的配方為:MS培養基+NAA?0.4-0.6mg/L+蔗糖28-32g/L+瓊脂6-8g/L,PH?5.6-6.0。
4.如權利要求1所述的一種百合的根尖脫毒與快繁方法,其特征在于,所述步驟1中根尖伸長培養基的配方為:MS培養基+NAA?0.2-0.5mg/L+蔗糖28-32g/L+瓊脂6-8g/L,PH?5.6-6.0。
5.如權利要求1所述的一種百合的根尖脫毒與快繁方法,其特征在于,所述步驟2中的體胚誘導培養基的配方為:MS培養基+毒莠定0.8-1.2mg/L+6-BA?0.4-0.6mg/L+蔗糖28-32g/L+瓊脂6-8g/L,PH?5.6-7.0。
6.如權利要求1所述的一種百合的根尖脫毒與快繁方法,其特征在于,所述步驟2之后還包括:將所述胚性愈傷組織接種到體胚增殖培養基上培養,使所述胚性愈傷組織增殖。
7.如權利要求1所述的一種百合的根尖脫毒與快繁方法,其特征在于,所述體胚增殖培養基的配方為:MS培養基+毒莠定0.2-0.5mg/L+蔗糖28-32g/L+瓊脂6-8g/L,PH?5.6-7.0。
8.如權利要求1或6所述的一種百合的根尖脫毒與快繁方法,其特征在于,還包括:將胚性愈傷組織或增殖后的胚性愈傷組織接種到分化生根培養基上培養,將體胚發育成完整的試管苗。
9.如權利要求8所述的一種百合的根尖脫毒與快繁方法,其特征在于,所述分化生根培養基的配方為:MS培養基+6-BA?0.2-0.5mg/L+NAA?0.2-0.5mg/L+蔗糖28-32g/L+瓊脂6-8g/L,PH?5.6-7.0。
10.如權利要求8所述的一種百合的根尖脫毒與快繁方法,其特征在于:所述試管苗通過RT-PCR病毒檢測方法確定是否含有百合病毒。
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