[發明專利]一種藻藍蛋白的提取方法

有效

• 申請號: 201410409170.5
• 申請日: 2014-08-19
• 公開（公告）號: CN104151424B
• 公開（公告）日: 2017-05-10
• 發明（設計）人: 張兵權
• 申請（專利權）人: 浙江賓美生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/795
• 分類號: C07K14/795;C07K1/34
• 代理公司: 臺州市方圓專利事務所(普通合伙)33107
• 代理人: 蔡正保,朱新穎

技術領域

本發明涉及一種藻藍蛋白的提取方法，屬于生物醫藥技術領域。

背景技術

藻藍蛋白是從含藻膽體的藻類細胞中提取，是藍藻中僅有的捕光色素蛋白，是非常少見的天然藍色色素和營養素，具有獨特的藥用功效和熒光性質。其中以螺旋藻為代表的藍藻中具有豐富的藻藍蛋白，并具有安全性和高消化吸收率，經中國衛生部和美國食品藥品管理局認證螺旋藻完全無毒副作用，是安全的植物藥品及保健品。

然而，現有的細胞破碎法有自然溶脹法、反復凍融法、超聲波法和酶解法。自然溶脹法一般需要10到20天，且破壁效率不高，容易導致微生物大量繁殖腐敗，生產過程難以控制。反復凍融法一般需要三次以上才能達到有效破壁，且每次凍融需要3到5天，整個破壁流程需要9到15天以上，且能耗巨大。超聲波法需要在低濃度的藻細胞溶液中有效，高濃度的藻液中超聲難以傳播，低濃度的藻溶液給后續的干燥帶來困難，而且超聲波容易導致蛋白質變性失活，產品收率低。酶解法使用的破壁酶價格昂貴，且市場不能持續穩定供應，對體系的溫度和PH值要求嚴格。原有公布的純化方法有硫酸銨沉淀法，雙水相法，色譜柱層析法等。硫酸銨沉淀和雙水相法，使用大量的化工原料硫酸鹽和聚乙二醇類，給環境造成污染。而且產品中硫酸銨的殘留難以全部清除。色譜層析法，需要消耗大量昂貴的填料耗材，且設備難以放大，層析速度慢。如中國專利申請(CN103304068A)公開了一種藻藍蛋白的制備方法，以鮮藻或螺旋藻粉為原料，加入去離子水，混勻，然后置于-20℃～-10℃冰凍，凍結后，取出置35℃融溶，凍融3～4次，用120目紗布過濾，離心分離，得上清液，純度為1.0左右，再進行雙水相萃取、超濾分離純化，冷凍干燥，得到藻藍蛋白。其采用反復凍融法存在生產周期長的問題，而采用雙水相法對環境的污染較大。

發明內容

本發明針對以上現有技術中存在的問題，提供一種藻藍蛋白的提取方法，具有提取效率和破壁率高且對環境污染少的效果。

本發明的目的是通過以下技術方案得以實現的，一種藻藍蛋白的提取方法，該方法包括以下步驟：

A、破壁：將含有藻藍蛋白的鮮藻或經過預浸泡的藻粉加入-50℃～-10℃的冰粉中，將攪拌速度控制在1000r/min～3000r/min的條件下進行破壁處理，得到含有藻藍蛋白的破壁液；

B、將得到的含有藻藍蛋白的破壁液進行分離、純化和干燥，得到成品藻藍蛋白。

上述藻藍蛋白的提取方法中，所述的分離可以采用本領域常規的方法，如采用沉淀法分離或離心分離方法等。作為優選，步驟B中所述分離具體為：

將采用醫用脫脂棉制成的棉柱插入上述步驟A中得到的含有藻藍蛋白的破壁液中使藻藍蛋白吸附在棉柱上，分離棉柱上的藍色部分，采用擠壓和水進行沖洗，得到含藻藍蛋白的水溶液。采用本發明的分離方法不僅能夠提高產品的純度，且對環境友好，無需采用硫酸銨等化學試劑。當然，采用本發明的分離方法，而采用本領域常規的破壁方法如反復凍融法、超聲波破壁法，同樣能夠實現提高產品純度的效果。

上述藻藍蛋白的提取方法中，作為優選，步驟B中所述純化和干燥具體為：

將得到的含藻藍蛋白的水溶液采用超濾膜進行過濾和濃縮，得到含藻藍蛋白的濃縮液；再將含藻藍蛋白的濃縮液進行干燥，得到成品藻藍蛋白。