[發(fā)明專利]一種Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法

無效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410407234.8
• 申請(qǐng)日: 2014-08-19
• 公開（公告）號(hào): CN104151317A
• 公開（公告）日: 2014-11-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 盧俊靈
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州維泰生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): C07D473/18
• 分類號(hào): C07D473/18
• 代理公司: 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 32200
• 代理人: 曹毅

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于化學(xué)合成領(lǐng)域，涉及一種中間體的合成方法，具體是涉及一種Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法。

背景技術(shù)

目前合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的路線如下：????????????????????????????????????????????????

a.6-氯鳥嘌呤于DMF中加入碳酸鉀，滴入溴乙酸芐酯，反應(yīng)后過濾，濾液倒水中，加入濃鹽酸調(diào)pH為3-4，得到產(chǎn)品Ga。

b.在-5℃THF中，將Ga溶液其中，加入三光氣攪拌，然后滴入DIEA，和固體二苯甲醇后室溫過夜反應(yīng)，然后加入甲醇，除去溶解，油狀物溶解，重結(jié)晶得到Gb。

c.把NaH于THF中，溶液冷卻到-30℃，然后滴入3-羥基丙腈，然后在0℃下攪拌反應(yīng)，然后加入Gb，反應(yīng)液室溫過夜，用檸檬酸溶液調(diào)pH為3-4，過濾得到粗品，然后在甲醇中重結(jié)晶，旋干純產(chǎn)品Gc。?????

d.將Gc溶于干燥的DMF中，加入NMM，溫度降到-20℃，滴加特戊酰氯，原料消失，加入N-(2-Fmoc-氨乙基)甘氨酸甲酯鹽酸鹽溶解，攪拌反應(yīng)2h，倒入水中，固體析出，過濾出固體即為產(chǎn)品Gd。

e.將Gd于乙腈中冷卻-30℃，滴加2M?LiOH溶液，直到反應(yīng)完全，用檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH為3-4，得到粗固體，用二氯甲烷：甲醇10:1硅膠柱（200-300目）得到純度為95%的產(chǎn)品Ge。

??該工藝在d步驟中，對(duì)試劑及溶劑的無水要求較高，水分會(huì)降低的轉(zhuǎn)化率，而且反應(yīng)需要低溫反應(yīng)，成本較高，不宜放大反應(yīng)。

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發(fā)明內(nèi)容

要解決的技術(shù)問題：常規(guī)的Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法中對(duì)試劑和溶劑的無水要求較高，水分會(huì)降低的轉(zhuǎn)化率，而且反應(yīng)需要低溫反應(yīng)，成本較高，不宜放大反應(yīng)。最終制備得到的Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的純度較低，只有95%左右。

?技術(shù)方案：針對(duì)上述問題，本發(fā)明公開了一種Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，解決原類似合成方法存在的操作難，產(chǎn)率低，成本高、不宜放大生產(chǎn)的技術(shù)問題。

本發(fā)明的一種合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，包括以下步驟：

???步驟1）6-氯鳥嘌呤于DMF中加入碳酸鉀，加熱溶解，然后冷卻溶液至-5℃，滴入溴乙酸芐酯，然后室溫?cái)嚢柽^夜，然后過濾，濾液倒水中，加入濃鹽酸調(diào)pH為酸性，攪拌過濾產(chǎn)品，水洗，重結(jié)晶，旋干純產(chǎn)品Ga。

步驟2）把Ga加入到-5℃的THF中，加入三光氣攪拌，然后滴入DIEA，再加入二苯甲醇后室溫過夜反應(yīng)，然后加入乙醇，旋干溶液，然后用DCM溶解，用檸檬酸溶液洗，然后再用碳酸氫鈉溶調(diào)pH為3得到粗產(chǎn)品，重結(jié)晶得到Gb。

步驟3）把NaH于THF中，溶液冷卻到-30℃，然后滴入3-羥基丙腈，然后在0℃下攪拌反應(yīng)，然后加入Gb，反應(yīng)液室溫過夜，用檸檬酸溶液調(diào)pH為3-4，過濾得到粗品，然后在甲醇中重結(jié)晶，旋干純產(chǎn)品Gc。?????

步驟4）將Gc、HBTU和N-(2-Fmoc-氨乙基)甘氨酸甲酯鹽酸鹽于DMF中，攪拌均勻后，滴加NMM，攪拌反應(yīng)2h，倒入水中，得到產(chǎn)品Gd。

步驟5）將Gd于乙腈中冷卻-30℃，滴加2M?LiOH溶液，直到反應(yīng)完全，用檸檬酸溶液調(diào)節(jié)pH為3-4，得到粗固體，二氯甲烷、甲醇硅膠柱（200-300目）得到99%純度的產(chǎn)品Ge。

所述的一種合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，合成方法路線如下：

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本發(fā)明中用到的試劑縮寫表示如下：

Fmoc-osu：芴甲氧羰酰琥珀酰亞胺

Me：甲基

HBTU:苯并三氮唑-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸鹽

NMM：N-甲基嗎啡啉

DMF:N,N-二甲基甲酰胺

THF:四氫呋喃

DIEA：N,N-二異丙基乙胺

有益效果：本發(fā)明的Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法中反應(yīng)試劑及溶劑不要求苛刻的無水，室溫下轉(zhuǎn)化率較高，降低了成本，操作簡(jiǎn)單，易于放大量的生產(chǎn)。并且最終合成得到的Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH純度達(dá)到95%，產(chǎn)率為75%。

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具體實(shí)施方式

實(shí)施例1