[發明專利]一種Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法

無效

• 申請號: 201410407234.8
• 申請日: 2014-08-19
• 公開（公告）號: CN104151317A
• 公開（公告）日: 2014-11-19
• 發明（設計）人: 盧俊靈
• 申請（專利權）人: 蘇州維泰生物技術有限公司
• 主分類號: C07D473/18
• 分類號: C07D473/18
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 曹毅

1.一種合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，其特征在于所述的合成方法包括以下步驟：

步驟1）6-氯鳥嘌呤于DMF中加入碳酸鉀，加熱溶解，然后冷卻溶液至-5℃，滴入溴乙酸芐酯，然后室溫攪拌過夜，然后過濾，濾液倒水中，加入濃鹽酸調pH為酸性，攪拌過濾產品，水洗，重結晶，旋干純產品Ga；

步驟2）把Ga加入到-5℃的THF中，加入三光氣攪拌，然后滴入DIEA，再加入二苯甲醇后室溫過夜反應，然后加入乙醇，旋干溶液，然后用DCM溶解，用檸檬酸溶液洗，然后再用碳酸氫鈉溶調pH為3得到粗產品，重結晶得到Gb；

步驟3）把NaH溶于THF中，溶液冷卻到-30℃，然后滴入3-羥基丙腈，然后在0℃下攪拌反應，然后加入Gb，反應液室溫過夜，用檸檬酸溶液調pH為3-4，過濾得到粗品，然后在甲醇中重結晶，旋干純產品Gc；?????

步驟4）將Gc、HBTU和N-(2-Fmoc-氨乙基)甘氨酸甲酯鹽酸鹽于DMF中，攪拌均勻后，滴加NMM，攪拌反應2h，倒入水中，得到產品Gd；

步驟5）將Gd于乙腈中冷卻-30℃，滴加2M?LiOH溶液，直到反應完全，用檸檬酸溶液調節pH為3-4，得到粗固體，二氯甲烷、甲醇硅膠柱（200-300目）得到99%純度的產品Ge。

2.根據權利要求1所述的一種合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，其特征在于合成方法路線如下：

。

3.根據權利要求1所述的一種合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，其特征在于所述的步驟1）為：

把6-氯鳥嘌呤（50g，0.295mol）和碳酸鉀（61g，0.44mol）加入到500ml的DMF中，加熱溶液溫度至84℃，直至6-氯鳥嘌呤全部溶解，然后冷卻溶液至-5℃，滴入溴乙酸芐酯，滴完后該溫度下再攪拌3小時，然后室溫攪拌過夜，然后過濾，濾液倒入1.2L水中，加入濃鹽酸調pH為3-4，攪拌2小時后過濾產品，水洗，乙腈重結晶，拉干產品得到68g，產率72.7%，HPLC=95%。

4.根據權利要求1所述的一種合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，其特征在于所述的步驟2）為：在-5℃條件下，把Ga（50g，0.158mol）加入到冰冷的500ml?THF中，攪拌下加入三光氣（160.8g，0.0566mol），然后攪拌1小時，然后滴入DIEA（44.2g，0.343mol），再攪拌30min，加入二苯甲醇（47.4g，0.2575mol）后室溫過夜反應，然后加入乙醇，旋干溶液，然后用DCM溶解，用10%的檸檬酸洗，然后再用5%的碳酸氫鈉溶液洗，旋出DCM，產品用甲醇重結晶后拉干得到68g產品，產率80%，HPLC=80%。

5.根據權利要求1所述的一種合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，其特征在于所述的步驟3）為：把NaH（11.36g，0.4735mol）加入到585ml?THF中，溶液冷卻到-30℃，然后滴入3-羥基丙腈（33.6g，0.4735mol），然后在0℃下攪拌2.5小時，然后加入Gb（50g，0.0947mol），反應液室溫過夜，蒸去大部分溶液，加入適量水中，20%的檸檬酸調pH為3-4，過濾得到粗品，然后在甲醇中重結晶，拉干得到23g產品，產率58%，HPLC=92%。

6.根據權利要求1所述的一種合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，其特征在于所述的步驟4）為：將Gc(8.38g,0.02mol)、HBTU(9.09g,0.024mol)和N-(2-Fmoc-氨乙基)甘氨酸甲酯鹽酸鹽（7.8g,0.02mol）于DMF中，攪拌均勻后，滴加NMM(6.06g,0.06mol)，攪拌反應2h，倒入水中，得到產品Gd,層析法得到純產品8.5g，收率56%，HPLC=97%。

7.根據權利要求1所述的一種合成Fmoc-PNA-G(Bhoc)-OH的合成方法，其特征在于所述的步驟5）為：將Gd(8.5g,0.011mol）溶于50ml乙腈中冷卻至-30℃，滴加2M?LiOH溶液，點板跟蹤直到反應完全，用檸檬酸溶液調節pH為3-4，得到粗固體，過硅膠柱得到98%純度的產品6.3g?Ge，產率75%，HPLC=95%。