[發明專利]一種新型檢測人布魯氏菌病抗體的免疫層析試紙及制備方法

在審

• 申請號: 201410405061.6
• 申請日: 2014-08-18
• 公開（公告）號: CN104360058A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 石峰;王遠志;陳創夫;程婷婷;錢紅;李志強
• 申請（專利權）人: 石河子大學
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種新型檢測人布魯氏菌病抗體試紙條，其包括：被檢測抗體與特異性檢測抗原的反應膜和膠體金標記結合物釋放墊、樣品墊和吸水墊，其中所述的反應膜上包被有布魯氏菌特異性檢測抗原作為檢測線，以及可與標記抗原重組大消化鏈球菌蛋白L(protein?L)發生結合的抗體作為質控線。

2.由權利要求1所述的檢測人布魯氏菌抗體試紙條其特征在于，其中所述的特異性檢測抗原為布魯氏菌VirB5蛋白，這種VirB5蛋白是通過基因工程方法重組表達獲得。

3.由權利要求1所述的試紙條其特征在于，標記材料為10nm-70nm的膠體金，制備方法采用檸檬酸三鈉還原氯金酸的方式獲得。

4.由權利要求1所述的試紙條其特征在于，其中所述的膠體金標記結合物釋放墊為：制備的膠體金標記重組大消化鏈球菌蛋白L(protein?L)，溶解在免疫金工作液中，噴涂在玻璃纖維膜、聚酯纖維膜等材質干燥后制備得到。

5.如權利要求1所述的布魯氏菌抗體檢測試紙條，特征在于：所述反應膜為硝酸纖維素膜、尼龍膜、醋酸纖維素膜、聚酯膜，或硝酸纖維素與醋酸纖維素的混合膜之一；所述結合物釋放墊的材質為玻璃纖維或聚酯纖維，上樣墊的材質為玻璃纖維或聚酯纖維裁剪成型；然后用上墊處理液浸泡，然后15℃到60℃烘干或冷凍干燥。

6.根據權利要求3所述的試紙條，其特征在于，所述的反應膜的檢測線為布魯氏菌的VirB5蛋白，該定位于細菌表面蛋白外側且具有較高的免疫原性，能夠準確指示出體液中的布魯氏菌抗體的存在；反應膜上的質控線為能與重組大消化鏈球菌蛋白L(protein?L)結合的IgG類抗體。

7.將制備好的反應膜以及結合物釋放墊、上樣墊、吸水墊和反應膜組裝在支撐板上然后裁剪成不同規格的試紙條，檢測試紙條結合一定模具可制備成布魯氏菌抗體檢測卡和檢測試紙筆。