[發明專利]一種有抑制酪氨酸酶活性的漆樹多酚提取物及其制備方法

在審

• 申請號: 201410402087.5
• 申請日: 2014-08-15
• 公開（公告）號: CN104147064A
• 公開（公告）日: 2014-11-19
• 發明（設計）人: 王成章;陳虹霞;葉建中
• 申請（專利權）人: 中國林業科學研究院林產化學工業研究所
• 主分類號: A61K36/22
• 分類號: A61K36/22;A61K8/97;A61P17/00;A61Q19/02
• 代理公司: 無
• 代理人: 無

1.一種有抑制酪氨酸酶活性的漆樹多酚提取物及其制備方法，其特征在于由以下步驟組成：

第一步

將漆樹木材干燥、粉碎，去渣，按質量體積比為1:5~1:30(g:mL)，加入質量分數為50~95%的乙醇水溶液，常溫或加熱回流提取、或減壓回流提取、或超聲波輔助提取或微波輔助提取2~3次，每次10min~10h，過濾，濾液合并，于40~60℃下減壓蒸發除去溶劑，再經真空干燥或冷凍干燥，得到粗提物；

第二步

粗提物按質量比1:5~1:10(g:mL)加入蒸餾水，攪拌溶解，加入石油醚萃取3~5次，分離，在40~60℃下減壓蒸發除去溶劑，得到石油醚萃取物；水層繼續用乙酸乙酯萃取3~5次，分離，在40~60℃下減壓蒸發除去溶劑，干燥得到乙酸乙酯相;

第三步

將乙酸乙酯萃取物按質量比1:5~1:10加入質量分數為10%的乙醇水溶液，超聲震蕩溶解，用大孔吸附樹脂柱吸附分離，乙酸乙酯萃取物與大孔吸附樹脂質量體積比(g:mL)為1:20~50；先用質量分數為10~20%的乙醇水溶液進行洗脫，洗至無色，除去極性大的雜質，再用質量分數為30~60%的乙醇水溶液進行洗脫，洗脫劑用量為3-6倍住體積，收集洗脫液，于40~60℃下減壓蒸發除去溶劑，真空干燥，即得漆樹多酚提取物；

第四步

將漆樹多酚提取物進行HPLC分析，總多酚含量為50~60%，其中漆黃素含量為0.4~0.7%，黃顏木素含量為5~10%，硫黃菊素含量為0.5~1%和紫鉚花素含量為0.2~0.5%，漆酚的含量<5PPm;

第五步

將漆樹多酚提取物進行抑制酪氨酸酶活性研究，當濃度范圍在400~600ug/mL，抑制率為60~80%，其IC50值為308μg/mL；通過對抑制酪氨酸酶活性的機理研究，其抑制類型為混合型。

2.根據權利要求所述一種有抑制酪氨酸酶活性的漆樹多酚提取物及其制備方法，其特征在于第一步中加熱回流提取的溫度為50~90℃，減壓回流提取的真空度為0.04~0.1MPa，溫度40~70℃，超聲輔助提取的功率為120~600W，溫度為30~60℃，微波輔助提取的功率為500~800W，溫度40~70℃。

3.根據權利要求1所述一種有抑制酪氨酸酶活性的漆樹多酚提取物及其制備方法，其特征在于第二步中石油醚萃取的目的為除去漆樹漆酚化合物，漆酚的含量<5PPm。

4.根據權利要求1所述一種有抑制酪氨酸酶活性的漆樹多酚提取物及其制備方法，其特征在于第三步中的大孔吸附樹脂選自LK001、122、聚酰胺、DM101、AB-8、M1180N和D285中的一種或幾種。

5.根據權利要求1所述一種有抑制酪氨酸酶活性的漆樹多酚提取物及其制備方法，其特征在于第四步中的HPLC分析，其色譜條件為：色譜柱為RP-18?endcapped?柱(4.6×250mm,5μm),流動相為體積比為35:65的甲醇-0.5%醋酸水溶液，紫外檢測器，檢測波長為280和360nm,?流速為1mL/min。

6.根據權利要求1所述一種有抑制酪氨酸酶活性的漆樹多酚提取物及其制備方法，其特征在于漆樹多酚提取物對酪氨酸酶具有顯著的抑制作用，能夠用于美白化妝品、預防和治療由于人體黑色素過多導致的沉著性疾病。