[發(fā)明專利]一種喇叭唇石斛的無激素組織培養(yǎng)方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410401179.1 | 申請日： | 2014-08-13 |
| 公開（公告）號： | CN105325290A | 公開（公告）日： | 2016-02-17 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 姚春;白燕冰;李澤生 | 申請（專利權(quán)）人： | 云南省德宏熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)研究所 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 678600*** | 國省代碼： | 云南;53 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 喇叭 石斛 激素 組織培養(yǎng) 方法 | ||
1.一種喇叭唇石斛的無激素組織培養(yǎng)方法，具體包括以下步驟：
(1)種子的無菌萌發(fā)
將成熟未開裂的喇叭唇石斛蒴果經(jīng)消毒處理，種子均勻播入3/4MS培養(yǎng)基+土豆泥40～70g/L培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度23～26℃，先暗培養(yǎng)7～12d，再光照培養(yǎng)，每天光照10h，光照強(qiáng)度1500～3000lx；
(2)原球莖的增值分化
將綠色原球莖轉(zhuǎn)入3/4MS培養(yǎng)基+土豆泥100～120g/L+香蕉泥20～40g/L培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度23～26℃，每天光照10h，光照強(qiáng)度1500～3000lx；
(3)無菌苗的生根壯苗培養(yǎng)
將原球莖分化出的2～3cm的幼苗轉(zhuǎn)入1/2MS培養(yǎng)基+土豆泥80～100g/L+香蕉泥20～30g/L+西瓜汁20～30g/L+活性炭0.4g/L培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)條件：培養(yǎng)溫度25～28℃，每天光照10h，光照強(qiáng)度2000～3000lx；
(4)無菌苗的煉苗及移栽
煉苗：當(dāng)瓶內(nèi)80％以上的苗長至株高5～8cm，有5～8條長3cm以上粗壯根時(shí)可進(jìn)行出瓶，方法是將可以出瓶的瓶苗從培養(yǎng)室內(nèi)移置遮光率為70％～85％的溫室大棚內(nèi)，放置20d，之后再打開瓶蓋繼續(xù)放置7d，棚內(nèi)要保持通風(fēng)透氣，控制好光照；
移栽：移栽時(shí)將苗從瓶內(nèi)取出，用自來水將附在根上的培養(yǎng)基清洗干凈，然后放進(jìn)稀釋2000倍的多菌靈、百菌清等殺菌劑溶液中消毒5min，撈起放在透氣塑料筐上晾干水分，按3株/叢，株行距5cm×5cm移栽到鋪好基質(zhì)的苗床上，基質(zhì)選用透氣的椰殼+水苔，栽后注意保持環(huán)境通風(fēng)、遮陽，苗床上無積水，濕度保持在75％～85％之間，待苗抽出新芽、新葉、新根后即可移栽大田；
以上培養(yǎng)基PH值均為5.8～6.0，均含白糖25g/L，瓊脂4.8g/L，土豆泥為新鮮土豆去皮切絲煮20min后用果汁機(jī)打碎成泥，香蕉泥為新鮮香蕉去皮煮20min用果汁機(jī)打碎成泥，西瓜汁為新鮮西瓜削去青色外皮把白色的皮和瓤一起煮20min后用果汁機(jī)打成汁。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種喇叭唇石斛的無激素組織培養(yǎng)方法，其特征在于種子無菌萌發(fā)時(shí)先進(jìn)行7～12d的暗培養(yǎng)，再進(jìn)行光照培養(yǎng)，每天光照10h，光照強(qiáng)度1500～3000lx。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種喇叭唇石斛的無激素組織培養(yǎng)方法，其特征在于所用培養(yǎng)基的添加物為新鮮的土豆泥、香蕉泥、西瓜汁，土豆泥為新鮮土豆去皮切絲煮20min后用果汁機(jī)打碎成泥，香蕉泥為新鮮香蕉去皮煮20min用果汁機(jī)打碎成泥，西瓜汁為新鮮西瓜削去青色外皮把白色的皮和瓤一起煮20min后用果汁機(jī)打成汁；
種子無菌萌發(fā)培養(yǎng)基為3/4MS培養(yǎng)基+土豆泥40～70g/L，原球莖的增值分化培養(yǎng)基為3/4MS培養(yǎng)基+土豆泥100～120g/L+香蕉泥20～40g/L，生根壯苗培養(yǎng)基為1/2MS培養(yǎng)基+土豆泥80～100g/L+香蕉泥20～30g/L+西瓜汁20～30g/L+活性炭0.4g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種喇叭唇石斛的無激素組織培養(yǎng)方法，其特征在于煉苗時(shí)將可以出瓶的瓶苗從培養(yǎng)室內(nèi)移置遮光率為70％～85％的溫室大棚內(nèi)，放置20d，之后再打開瓶蓋繼續(xù)放置7d，棚內(nèi)保持通風(fēng)透氣，控制好光照。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種喇叭唇石斛的無激素組織培養(yǎng)方法，其特征在于移栽基質(zhì)為透氣的椰殼+水苔，移栽前用稀釋2000倍的多菌靈、百菌清等殺菌劑溶液中消毒3～5min，按3株/叢，株行距5cm×5cm進(jìn)行移栽。
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